azM4-1M4-1乳及乳制品中脂肪的测定乳及乳制品中脂肪的测定食品检验工(中、高级)资源建设主讲:芜湖职业技术学院许月明—1—罗紫罗紫--哥特里法哥特里法1巴布科克法和盖勃法巴布科克法和盖勃法2目录页CONTENTSPAGE—2—1罗紫-哥特里法•原理•适用范围•仪器及试剂•操作方法•结果计算•说明及注意事项—3—1罗紫-哥特里法原理:利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜使非脂成分溶解于氨一乙醇溶液中,而脂肪游离出来,再用乙醚—石油醚提取出脂肪,蒸馏去除溶剂后,残留物即为乳脂肪。1罗紫-哥特里法适用范围:本法适用于各种液状乳能在碱性溶液中溶解的乳制品,也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。注:乳类脂肪虽然也属于游离脂肪,但因脂肪球被乳中酪蛋白钙盐包裹,又处于高度分散的胶体分散系中,故不能直接被乙醚、石油醚提取,需预先用氨水处理,故此法也称为碱性乙醚提取法。—4——5—1罗紫-哥特里法所需仪器1)罗兹-哥特里抽脂瓶(内径2.0~2.5cm,容积100mL)2)100mL抽脂瓶(无抽脂瓶时可用容积100mL具塞量筒代替)1罗紫-哥特里法3)移液管:使用的规格为25mL,所移取的体积通常可准确到0.01mL。在使用移液管时,为了减少测量误差,每次都应从最上面刻度(0刻度)处为起始点,往下放出所需体积的溶液,而不是需要多少体积就吸取多少体积。所需仪器—6—1罗紫-哥特里法所需仪器—7—移液管规范操作1罗紫-哥特里法4)电热恒温水浴锅:注水时不可将水流入控制箱内,以防发生触电,使用后箱内水应及时放净,并擦拭干净,保持清洁以利延长使用寿命。加水之前切勿接通电源,而且在使用过程中,水位必须高于隔板,切勿无水或水位低于隔板加热,否则会损坏加热管。所需仪器—8—1罗紫-哥特里法所需仪器5)电热恒温干燥箱(使用是在80-120℃)—9—1罗紫-哥特里法所需仪器6)分析天平—10—规范操作—11—1罗紫-哥特里法试剂:(1)乙醚(不含过氧化物):无色透明液体。有特殊刺激气味,带甜味,极易挥发;作用:提取脂肪—12—1罗紫-哥特里法试剂:(2)石油醚(沸程30~60℃):石油醚是无色透明液体,有煤油气味。主要为戊烷和己烷的混合物;作用:降低乙醚的极性,使乙醚与水不混溶,只抽出脂肪,并使分层清晰。1罗紫-哥特里法试剂:(3)乙醇(体积分数为95%):乙醇是一种有机物,俗称酒精。在常温、常压下是一种易燃、易挥发的无色透明液体,它的水溶液具有酒香的气味,并略带刺激。作用:沉淀蛋白质以防止乳化,并溶解醇溶性物质,使其留在水中,避免进入醚层,影响结果。—13—1罗紫-哥特里法试剂:(4)氨水(相对密度0.91)作用:使酪蛋白钙盐变成可溶解的盐。—14——15—1罗紫-哥特里法(1)仪器准备恒重接收瓶,洗涤干燥抽脂瓶。(2)抽提吸取10.0ml试样于抽脂瓶中,加入1.25ml氨水,充分混匀,置60℃水浴中加热5min,再振摇2min,加入10ml乙醇,充分摇匀,于冷水中冷却后,加入25ml乙醚振摇0.5min,再加入25ml石油醚,震荡0.5min。静止30min,待上层液澄清时,读取醚层体积。操作方法1罗紫-哥特里法操作方法(3)待上层液澄清时,读取醚层体积。用移液管将有机层吸入至已恒重的接受瓶中。再加乙醚、石油醚(2-3次)的重复提取(每次用15ml),将有机层合并于同一接受瓶中。将接受瓶置于98~100℃干燥1h后称量,再置98~100℃干燥0.5h后称量,直至前后两次质量相差不超过1.0mg—16——17—1罗紫-哥特里法X=式中:X-------试样中脂肪的含量,单位为克每百克(g/100g);m1-----接受瓶加脂肪质量,单位为克(g);m0-----接受瓶质量,单位为克(g);m2-----试样质量(吸取体积乘以牛乳的相对密度),单位为克(g);V0------读取乙醚层总体积,单位为毫升(ml);V1------放出乙醚层体积,单位为毫升(ml)。结果计算100)()(4321mmmmm(g/100g)1罗紫-哥特里法结果计算(1)有效数字:计算结果保留三位有效数字(2)精密度:在独立条件下获得的两次独立测定结果之差应符合:脂肪含量≥15g/100g,≤0.3g/100g脂肪含量5~15g/100g,≤0.2g/100g脂肪含量≤5g/100g,≤0.1g/100g—18——19—1罗紫-哥特里法1)若无抽脂瓶时,可用容积100mL的具塞量筒替用,待分层后读数,用移液管吸出一定量...