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试验六-维生素C的定量测定

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百度文库1 姓名 :郭沈杰年级专业 :2012 级生物科学同组者 :蔡萍萍学号: 12050011012 实验六 维生素C 的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)一、实验目的掌握 2,6- 二氯酚靛酚法测定维生素C 的原理和方法。二、实验原理维生素 C 又称抗坏血酸 (ascorbic acid)。在 1928 年,从牛的肾上腺皮质中提取出的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。还原型抗坏血酸能还原染料2 ,6- 二氯酚靛酚钠盐。本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中, 2,6- 二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。因此可用 2,6- 二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍多加一些染料, 使滴定液呈淡红色,即为终点。若无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。三、实验仪器1、新鲜水果2、电子分析天平3、吸管4、容量瓶百度文库2 5、滴定装置6、锥形瓶7、研钵8、漏斗四、实验试剂1、2% 草酸溶液:草酸2g ,溶于 100ml蒸馏水。2、1% 草酸溶液:草酸1g ,溶于 100ml蒸馏水。3、标准维生素C 液:准确称取 10.0mg维生素 C,溶于 1% 草酸溶液, 并稀释至 100ml ,贮于棕色瓶中,冷藏,最好临用时配制。此溶液浓度0.1mg/ml. 4、0.1%2 , 6- 二氯酚靛酚溶液:称取500mg2 ,6- 二氯靛酚溶于300ml含有 104mg碳酸氢钠的热水中,冷却,加蒸馏水并稀释至500ml ,滤去不溶物,贮于棕色瓶中,冷藏。每次临用时,以标准抗坏血酸液标定。五、实验步骤(一)样品中抗坏血酸的提取:1、将水果用水洗干净,用滤纸吸取表面水分。2、称取 5.0g ,加 2% 草酸试剂 10ml 置研钵中研成浆状。3、称取浆状物5.0g ,倒入 50ml容量瓶中,用2% 草酸溶液稀释并定容,混匀,静止10 分钟,过滤(最初数毫升滤液弃去),滤液备用。(二)滴定:1、标准液的滴定:准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml于 100ml锥形瓶中,加9ml1%草酸溶液,用2,6- 二氯靛酚滴定至淡红色。滴定终点要保持15 秒钟。用所用2, 6-百度文库3 二氯靛酚的体积算出1ml 染料相当于多少毫克抗坏血酸。2、样品液的滴定:准确吸取滤液两份,每份10ml ,分别放入两个100ml锥形瓶中,滴定方法同上。注意事项:1、滴定过程宜迅速,一般不超过2min 。2、滴定所用染料一般不应少于1ml 或多于 4ml ,如果样品中含抗坏血酸太高或太低时,可酌量增减样液。3、研磨时要尽量研磨成浆状...

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