果蝇杂交实验一、实验目的二、实验材料三、实验器具和药品四、实验内容(一)果蝇形态的观察(二)果蝇的饲养(三)果蝇的杂交五、实验数据的统计及分析六、实验报告七、注意事项24/10/244一、实验目的24/10/245学会杂交实验设计的方法理解遗传的三大定律学会运用统计学和遗传学的理论分析实验现象初步学会论文的撰写方法24/10/246二、实验材料黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)品系18#、6#、e#、2#24/10/247三、实验器具和药品显微镜、培养瓶、棉塞、量筒麦片、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等24/10/248四、实验内容24/10/249(一)果蝇的形态观察24/10/24101、果蝇雌雄的区别•雄:腹部狭长,末端浑圆腹背有5条横纹,粗细不一致,末端2-3条横纹“连成一片”,呈现“黑屁股”一样;前足附节端表面有黑色“性梳”,在显微镜下呈黑梳子;•雌:腹部宽大,末端突尖,腹背有7条横纹,色淡,粗细一致,前足附趾无性梳;雌蝇体内有一储精囊,一次受精,终身够用,所以杂交时必须选择处女蝇24/10/24112、其他性状的观察眼色:白眼与红眼;翅形:长翅(正常翅)、短(小)翅、残翅;体色:黑檀体、灰身;刚毛:直刚毛、焦刚毛;果蝇几种品系的性状品系体色眼色翅形雌雄2#6#e#18#24/10/24133、其他卵:圆形,前端有两条触须突起,通常附在瓶壁上;幼虫:蛆状,奶白色,前端尖,后端钝,头部收缩迅速;蛹:黄色24/10/2414(二)果蝇的饲养24/10/24151、果蝇的生活史和生活习性成虫交配后1天成虫交配后1天3.5-4.5天后,羽化成虫3.5-4.5天后,羽化成虫产卵,1天孵化为一龄幼虫产卵,1天孵化为一龄幼虫1-1.5天后,成二龄虫1-1.5天后,成二龄虫1天后,成三龄虫1天后,成三龄虫2.5-3.5天后,成蛹2.5-3.5天后,成蛹24/10/2416羽化后的成虫一般要经过至少12小时才能交配,此时的成虫又称为处女蝇;温度越低,生活周期越长,25℃平均10-12天一个世代;但超过30℃易出现变异;生活习性:果蝇是以水果上的酵母为食,所以实验室内凡能发酵的基质都可作为果蝇的饲料。2、培养基的配制(以100ml量为例)70ml水+0.85g琼脂+7g蔗糖70ml水+0.85g琼脂+7g蔗糖煮开至琼脂溶化煮开至琼脂溶化加入麦片糊(30ml冷水与8g麦片混匀)加入麦片糊(30ml冷水与8g麦片混匀)煮开约3分钟煮开约3分钟稍凉后加入1g酵母粉,0.4-0.5ml丙酸,混匀稍凉后加入1g酵母粉,0.4-0.5ml丙酸,混匀分装,乘热塞上棉花塞。分装,乘热塞上棉花塞。24/10/24193、果蝇的麻醉(示范)注意:不可在培养瓶内麻醉;如果进行形态观察可进行深度麻醉至死——腹部向前弯;双翅向背后与胸部成45°如果进行杂交,一般成自然停飞状态为宜;4、转瓶(示范)5、处死6、取处女蝇•在培养瓶中出现第一个蛹后,除去所有的成虫,每隔9h观察一次,此时出现的雌蝇还未能进行交配,分离出来后即为处女蝇。24/10/2423(三)果蝇杂交的流程24/10/2424以6#♀×2#♂为正交取原种(纯种)取原种(纯种)6#5-6对于一培养瓶6#5-6对于一培养瓶2#5-6对于另一培养瓶2#5-6对于另一培养瓶每一培养瓶要贴标签,注明(杂交)品系,时间,班别,姓名每一培养瓶要贴标签,注明(杂交)品系,时间,班别,姓名7-8天后,出现第一个蛹时除去原种7-8天后,出现第一个蛹时除去原种7-8天后,出现第一个蛹时除去原种7-8天后,出现第一个蛹时除去原种每隔9h取一次处女蝇,共6-7对于一培养瓶中每隔9h取一次处女蝇,共6-7对于一培养瓶中超过9h的雌蝇坚决不能用于杂交,若混有一只雄蝇,所有雌蝇都无用!超过9h的雌蝇坚决不能用于杂交,若混有一只雄蝇,所有雌蝇都无用!取6-7对雄蝇于一培养瓶中取6-7对雄蝇于一培养瓶中若混有雌蝇,除去后,雄蝇仍可用若混有雌蝇,除去后,雄蝇仍可用6#♀与2#♂放入一培养瓶内杂交6#♀与2#♂放入一培养瓶内杂交杂交之前,反复检查雌内是否混有雄蝇,或雄蝇内是否混有雌蝇!杂交之前,反复检查雌内是否混有雄蝇,或雄蝇内是否混有雌蝇!用同样方法做反交实验出现第一个蛹后,除去亲本,之后出现的成虫即为F1代;若想增加F1的数量,可将亲本进行转瓶一次;出现第一个蛹后,除去亲本,之后出现的成虫即为F1代;若想增加F1的数量,可将亲...