源兴基因药物研发中心腺病毒载体工艺平台介绍10/24/20241基因药物研发中心研发中心厂房及设备源兴基因药物研发中心建筑面积1900多平方米，其中符合国家GMP要求的洁净厂房面积1600多平方米，包括原液生产车间、制剂生产车间、质量控制实验室以及研发实验室。研发中心配置了NBS细胞罐、AKTA纯化系统、高速冷冻离心机、切向流超滤系统、二氧化碳培养箱、生物安全柜、分析型HPLC系统、PCR仪、电泳仪、酶标仪、超声波破碎仪、超声波西林瓶清洗机、隧道式灭菌烘箱、液体灌装加塞机、轧盖机、凝胶扫描成像系统、超纯水仪、多效蒸馏水机等仪器设备。能够满足腺病毒载体药物研发、生产和质量控制的要求。10/24/20242基因药物研发中心10/24/20243基因药物研发中心10/24/20244基因药物研发中心10/24/20245基因药物研发中心10/24/20246基因药物研发中心10/24/20247基因药物研发中心10/24/20248基因药物研发中心10/24/20249基因药物研发中心研发中心生产系统组织图总经理生产总监工艺开发部（10人）质控部（5人）设备工程部（4人）物控部（3人）细胞病毒培养纯化制剂分装清洁辅助10/24/202410基因药物研发中心研发队伍•打造了一支技术过硬的研发队伍，能够保证工艺水平及产品质量稳定。•历经多次新药申报，比较熟悉新药审评程序和规定，积累了较丰富的申报经验，能够比较顺利的解决有关问题。10/24/202411基因药物研发中心管理制度•建立了300多个SOP、SMP等标准程序和规章管理制度，按照GMP要求严格规范管理。10/24/202412基因药物研发中心研发中心工艺平台•研发中心工艺产业化平台是通用型腺病毒载体药物生产工艺和质量标准研究的药学技术平台，中试生产工艺水平达到了国内同行业先进水平，可以在产量及质量上满足腺病毒载体药物临床前和临床用样品制备的要求。•本工艺拥有自主知识产权，可作为腺病毒载体新药研发及生产的技术基础。•5L细胞罐收获物经纯化后产量能达到E15VP/批，注射液制剂工艺达到了小容量水针1万支/批的生产能力。•产品纯度大于98%，比滴度大于3.3%，各项质检结果都能达到FDA对腺病毒类生物制品的质量标准要求。10/24/202413基因药物研发中心研发中心已完成申报临床所需药学研究的品种品种代号研究单位研究时间治疗性重组HBV腺病毒疫苗CHB3源兴2004年3月至2005年11月治疗性HIV腺病毒载体疫苗H30源兴2005年12月至2007年8月治疗性重组腺病毒EB病毒潜伏膜抗原疫苗LMP2CDC病毒病所委托源兴承担药学研究2007年9月至2008年10月10/24/202414基因药物研发中心新药申报三方面研究内容•药学研究•药效研究•安全评价10/24/202415基因药物研发中心药学研究主要内容•上游构建及鉴定•细胞/毒种研究及三级库建立•原液工艺研究•制剂工艺研究•检测方法及质量标准研究•稳定性研究•试制三批样品10/24/202416基因药物研发中心细胞及毒种研究•细胞检定、传代稳定性研究•毒种检定、代次及遗传稳定性研究10/24/202417基因药物研发中心建细胞库原始细胞细胞来源于ATCC主细胞库质量控制工作细胞库质量控制细胞扩增细胞扩增10/24/202418基因药物研发中心建毒种库工作种子批病毒扩增原始种子批主种子批鉴定检测质量控制质量控制病毒扩增10/24/202419基因药物研发中心原液工艺流程、参数及技术指标Sepharose6FastFlow分子筛层析回收率（3批平均）重组腺病毒种子罐收获物超滤浓缩液SOURCE30Q阴离子交换柱层析层析收集液原液6000RPM离心20min500K膜超滤浓缩10倍细胞种子细胞罐扩增5L罐细胞培养，病毒扩增：DO60%,37,℃pH7.2,耗糖40g/d接种病毒，MOI为20H30产量（3批平均）53%460ml1.1×1015VP10/24/202420基因药物研发中心细胞罐工艺细胞复苏培养毒种制备罐细胞培养罐细胞染毒罐病毒培养纯化10/24/202421基因药物研发中心细胞罐葡萄糖消耗监控曲线图图2六罐实验日糖耗曲线0102030405060701234567891011121314151617培养天数(天)日糖耗(g)B0704日糖耗(g)B0705日糖耗(g)B0706日糖耗(g)B0802日糖耗(g)B0803日糖耗(g)B0804日糖耗(g)10/24/202422基因药物研发中心细胞罐产毒浓度曲线图4EGFR三罐病毒培养期VP浓度曲线046304872961201440100000200000300000400000500000600000700000123456789病...
