实 验 二 ： 酶 活 力 测 定 方 法 的 研 究 一．研究背景及目的 酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化，所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色，因此对酶的研究有着非常重要的意义。酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。本实验选取萌发的禾谷类种子为材料，通过对其所含两种淀粉酶活力的测定来研究酶活力测定的方法。 二． 实验原理 萌发的种子中存在两种淀粉酶，分别是α 淀粉酶和β淀粉酶，β淀粉酶不耐热，在高温下易钝化，而α 淀粉酶不耐酸，在pH3.6 下则发生钝化[1]。本实验的设计利用β淀粉酶不耐热的特性，在高温下（70℃）下处理使得β淀粉酶钝化而测定α 淀粉酶的酶活性[1]。酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的，麦芽糖的浓度利用比色法可以很容易测得。然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性，拟将总活性与α 淀粉酶的活性的差值看作β淀粉酶的活性，再 做 进 一步分析 。实验中为了 消 除 非酶促 反应引 起 的麦芽糖的生成带 来的误 差，每 组 实验都做 了 相 应的对照 实验，在最 终 计算酶的活性时以测量组 的值减 去 对照 组 的值加 以校 正 。 三 ． 材料、 试 剂 与仪 器 材料： 萌发的小 麦种子 试 剂 ： ① 1%淀粉溶 液 （称 取1 克 可溶 性淀粉，加 入 80ml 蒸 馏 水 ，加 热熔 解 ，冷却 后定容至 100ml）； ② pH5.6 的柠 檬 缓 冲 液 ： A 液 （称 取柠 檬 酸 20.01 克 ，溶 解 后定容至 1L） B 液 （ 称 取 柠 檬 酸 钠29.41 克 ， 溶 解 后 定 容 至1L） 取A 液5.5ml、 B 液14.5ml混 匀 即 可 ； ③ 3， 5-二 硝 基 水 杨 酸 溶 液 （ 称 取 3， 5-二 硝 基 水 杨 酸 1.00 克 ， 溶 于 20ml 1M氢 氧 化 钠 中 ， 加 入 50ml 蒸 馏 水 ， 再 加 入 30 克 酒 石 酸 钠 ， 待 溶 解 后 ， 用 蒸 馏 水 稀释 至 100ml， 盖 紧 瓶 盖 保 存 ）； ④ 麦 芽 糖 标 准 液（ 称 取 0.100 克 麦 芽 糖 ，溶 于 少 量 蒸 馏 水 中 ，小 心 移 入 100ml容 量 瓶...
