DMEM、RIPA1640、F12、L15 等细胞培养基的基本知识 培养细胞的完全培养基由基础培养基（如 MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 一、基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物，其中含有 13 种必须氨基酸、8 种维生素。而 Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取 1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同 MEM 含有相同的营养成分，但浓度高出 2~4 倍。选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12 中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。 在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到 0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。MEM 与 F12 均要用 5%的 CO2 来平衡，DMEM 含更高浓度的 NaCO3，要用 10%的 CO2 来平衡，当然也可以在较低 CO2 浓度下使用。这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。 原则上，HEPES 作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度 CO2 培养环境的限制。实际操作中并非如此简单。显然，溶解的 CO2 与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。Leiboviz`s L15 培养基可用来在大气环境中令神经细胞生长，该培养基采用了与众不同的 BSS 作基础，它含有高浓度的氨基酸来提高缓冲能力，培养基中使用半乳糖作碳源，以阻止培养基中乳酸形成，少量溶解的CO2 由丙酮酸代谢产生。这一培养基的优点是明显的，特别是在保持较高 CO2有困难时，例如在长时间的显微操作及生理学研究中。L15 培养基已用来成功的培养了外周神经元，但尚未在 CNS 神经元的发育研究中全...
