ELISA完全总结

ELISA 缓 冲 液 配 方 书 中 ELISA 封 闭 液 ： 含 5%脱 脂 奶 粉 或 者 5%BSA 的 PBS， 请 问 5%BSA 指 的 也 是 质 量 分数 吗 ？ ， 因 为 师 姐 笔 记 写 的 是 体 积 分 数 ， 网 上 查 了 查 也 没 弄 清 楚 ， 请 指 教 。 样 品 稀 释 液 可 以 直 接 就 用 PBS 稀 释 吗 ？ 文 献 上 提 到 稀 释 液 中 也 含 脱 脂 奶 粉 或 BSA， 请 指 教 PBST 中 吐 温 -20 的 体 积 分 数 为 0.05%， 这 个 含 量 是 固 定 的 吗 ？ 1.含 5%脱 脂 奶 粉 或 者 5%BSA 的 PBS， 5%BSA 用 质 量 分 数 即 可 ； 2.样 品 稀 释 液 一 般 可 以 用 洗 液 直 接 稀 释 ， 也 可 加 入 一 些 蛋 白 （ 如 脱 脂 奶 粉 或BSA） 或 牛 、兔 等 血 清 ， 要 根 据 你 的 试 验 而 定 ； 3.至 于 PBST 中 吐 温 -20 的 体 积 分 数 ， 可 以 0.05%—0.2%， 可 以 在 你 试 验 过 程 中 摸 索 。 4.提 供 一 般 科 研 用 简 单 配 方 ， 这 些 你 都 可 以 在 网 上 或 别 人 的 文 章 中 查 到 ， 仅 供 参 考 ： 洗 涤 缓 冲 液 (PH7.4 PBS)： 0.15M KH2PO4 0.2 克 Na2HPO4·12H2O 2.9 克 NaCl 8.0 克 KCl 0.2 克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加 蒸 馏 水 至 1000ml 封 闭 液 ： 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 5 克 加 洗 涤 缓 冲 液 至 100ml。 稀 释 液 ： 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 1 克 加 洗 涤 缓 冲 液 至 100ml 或 以 羊 血 清 、 兔 血 清 等 血 清 与 洗 涤 液 配 成 5～ 10％ 使 用 。 BSA 最 好 现 配 ， 价 格又比脱 脂 奶 粉 贵， 所以 宜少量 现 用 现 配 ！ BSA 一 般 是 质 量 体 积 比， 正如 楼上 所说， 1%～ 3%为 宜， 如 果实在 是 结果假阳性多， 可 加到 5%！ TBST 中 吐 温 的 浓度与 你 的 洗 涤 强度（ 洗 涤 次数 ， 洗 涤 时间， 振荡幅度） 有关， 需要 按实验数 据 来变化！ 一 、 操作步骤 用 于 检测未知抗体 的 间接 法 1. 包被： 用0.05MpH9.6碳酸盐包被缓 冲 液 将抗原稀 ...