ELISA 缓 冲 液 配 方 书 中 ELISA 封 闭 液 : 含 5%脱 脂 奶 粉 或 者 5%BSA 的 PBS, 请 问 5%BSA 指 的 也 是 质 量 分数 吗 ? , 因 为 师 姐 笔 记 写 的 是 体 积 分 数 , 网 上 查 了 查 也 没 弄 清 楚 , 请 指 教 。 样 品 稀 释 液 可 以 直 接 就 用 PBS 稀 释 吗 ? 文 献 上 提 到 稀 释 液 中 也 含 脱 脂 奶 粉 或 BSA, 请 指 教 PBST 中 吐 温 -20 的 体 积 分 数 为 0.05%, 这 个 含 量 是 固 定 的 吗 ? 1.含 5%脱 脂 奶 粉 或 者 5%BSA 的 PBS, 5%BSA 用 质 量 分 数 即 可 ; 2.样 品 稀 释 液 一 般 可 以 用 洗 液 直 接 稀 释 , 也 可 加 入 一 些 蛋 白 ( 如 脱 脂 奶 粉 或BSA) 或 牛 、兔 等 血 清 , 要 根 据 你 的 试 验 而 定 ; 3.至 于 PBST 中 吐 温 -20 的 体 积 分 数 , 可 以 0.05%—0.2%, 可 以 在 你 试 验 过 程 中 摸 索 。 4.提 供 一 般 科 研 用 简 单 配 方 , 这 些 你 都 可 以 在 网 上 或 别 人 的 文 章 中 查 到 , 仅 供 参 考 : 洗 涤 缓 冲 液 (PH7.4 PBS): 0.15M KH2PO4 0.2 克 Na2HPO4·12H2O 2.9 克 NaCl 8.0 克 KCl 0.2 克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加 蒸 馏 水 至 1000ml 封 闭 液 : 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 5 克 加 洗 涤 缓 冲 液 至 100ml。 稀 释 液 : 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 1 克 加 洗 涤 缓 冲 液 至 100ml 或 以 羊 血 清 、 兔 血 清 等 血 清 与 洗 涤 液 配 成 5~ 10% 使 用 。 BSA 最 好 现 配 , 价 格又比脱 脂 奶 粉 贵, 所以 宜少量 现 用 现 配 ! BSA 一 般 是 质 量 体 积 比, 正如 楼上 所说, 1%~ 3%为 宜, 如 果实在 是 结果假阳性多, 可 加到 5%! TBST 中 吐 温 的 浓度与 你 的 洗 涤 强度( 洗 涤 次数 , 洗 涤 时间, 振荡幅度) 有关, 需要 按实验数 据 来变化! 一 、 操作步骤 用 于 检测未知抗体 的 间接 法 1. 包被: 用0.05MpH9.6碳酸盐包被缓 冲 液 将抗原稀 ...