FIS H 实验标准操作程序 (成都新基因格实验室内部完整版) 一 实验目的 通过荧光原位杂交实验,辅助临床医疗诊断: 提高优生优育(产前诊断中的应用)、 提前预防及治疗病患(产后诊断及膀胱癌诊断等)、 对肿瘤确诊病人评估预后及中位生存期、无病痛生存期(Dsease-Free Srvival,DFS),指导用药及治疗方案(针对乳腺癌、胃癌患者的 HER-2 基因诊断,针对 CML 患者的 bcr/abl 融合基因诊断等)。 二 实验原理 利用 DNA 碱基对的互补性,将直接标记了荧光的单链 DNA(探针)和与其互补的目标样本的 DNA(玻片上的标本)杂交,通过观察荧光信号在染色体上的位置反映相应染色体的情况 三 仪器设备及耗材 (一) 仪器设备: ①:全自动分子杂交仪 ②:荧光显微镜及分析软件 ③:恒温水浴箱3 个以上(小型号) ④:冰箱2 台(提供试 剂 和标本存放 , 4 摄 氏 度 和-20 摄 氏 度 ) ⑤ :离 心 机 (用于 羊 水标本以及血 液 标本,绒 毛 标本处 理过程的离 心 ) ⑥ :通风 橱 (配 固 定 液 ,等操作) ⑦ :迷 你 离 心 机 (探针,缓 冲 液 的离 心 。可 离 1.5ml 管 、0.2ml 管 ) ⑧ :考 普 林 瓶 15 个(FISH 实验中盛 放 各 种 试 剂 ,溶 液 ) ⑨ :移 液 枪 (5ml,1000ul,200ul,10ul)放 于 杂交室和制 备室。 10:震 荡 混 匀 器 11:计 时 器,温度 计 ,温度 湿 度 显示 器。 12:载 玻片盒 (用于 存放 已 经 FISH 实验后的 FISH 片子) 13:洗 耳 球 ,吸 量 管 (10ml),烧 杯 ,容 量 瓶 ,电 子天 平 ,常 用天 平 称 。 ( 二 ) 耗 材 : 载 玻 片 ( 最 好 , 带 磨 砂 的 , 写 用 铅 笔 患 者 编 号 , 因 为 不 带 磨 砂 的 贴 标 签 会 被乙 醇 洗 掉 。) 大 盖 玻 片 ( 方 形 , 用 于 镜 检 ) 小 盖 玻 片 ( 方 形 或 圆 形 , 圆 形 佳 , 用 于 分 子 杂 交 时 候 封 片 ) 离 心 管 ( 10ml, 1.5ml, 200ul) 3ml 一 次 性 吸 管 个 人 防 护 用 品 ,标 签 纸 等 。 四 实 验 样 本 及 试 剂 样 本 : 外 周 血 , 骨 髓 血 , 羊 水 , 尿 液 , 病 理 组 织 切 片 等 。 试 剂 :4%NaOH 液 、0.1...