FISH实验标准操作程序(FISH实验资料一)

FIS H 实验标准操作程序 （成都新基因格实验室内部完整版） 一 实验目的 通过荧光原位杂交实验，辅助临床医疗诊断： 提高优生优育（产前诊断中的应用）、 提前预防及治疗病患（产后诊断及膀胱癌诊断等）、 对肿瘤确诊病人评估预后及中位生存期、无病痛生存期(Dsease-Free Srvival,DFS)，指导用药及治疗方案（针对乳腺癌、胃癌患者的 HER-2 基因诊断，针对 CML 患者的 bcr/abl 融合基因诊断等）。 二 实验原理 利用 DNA 碱基对的互补性，将直接标记了荧光的单链 DNA(探针)和与其互补的目标样本的 DNA(玻片上的标本)杂交,通过观察荧光信号在染色体上的位置反映相应染色体的情况 三 仪器设备及耗材 （一） 仪器设备： ①：全自动分子杂交仪 ②：荧光显微镜及分析软件 ③：恒温水浴箱3 个以上（小型号） ④：冰箱2 台（提供试 剂 和标本存放 ， 4 摄 氏 度 和-20 摄 氏 度 ） ⑤ ：离 心 机 （用于 羊 水标本以及血 液 标本，绒 毛 标本处 理过程的离 心 ） ⑥ ：通风 橱 （配 固 定 液 ，等操作） ⑦ ：迷 你 离 心 机 （探针，缓 冲 液 的离 心 。可 离 1.5ml 管 、0.2ml 管 ） ⑧ ：考 普 林 瓶 15 个（FISH 实验中盛 放 各 种 试 剂 ，溶 液 ） ⑨ ：移 液 枪 （5ml，1000ul，200ul，10ul）放 于 杂交室和制 备室。 10：震 荡 混 匀 器 11：计 时 器，温度 计 ，温度 湿 度 显示 器。 12：载 玻片盒 （用于 存放 已 经 FISH 实验后的 FISH 片子） 13：洗 耳 球 ，吸 量 管 （10ml）,烧 杯 ，容 量 瓶 ，电 子天 平 ，常 用天 平 称 。 （ 二 ） 耗 材 ： 载 玻 片 （ 最 好 ， 带 磨 砂 的 ， 写 用 铅 笔 患 者 编 号 ， 因 为 不 带 磨 砂 的 贴 标 签 会 被乙 醇 洗 掉 。） 大 盖 玻 片 （ 方 形 ， 用 于 镜 检 ） 小 盖 玻 片 （ 方 形 或 圆 形 ， 圆 形 佳 ， 用 于 分 子 杂 交 时 候 封 片 ） 离 心 管 （ 10ml， 1.5ml， 200ul） 3ml 一 次 性 吸 管 个 人 防 护 用 品 ,标 签 纸 等 。 四 实 验 样 本 及 试 剂 样 本 ： 外 周 血 ， 骨 髓 血 ， 羊 水 ， 尿 液 ， 病 理 组 织 切 片 等 。 试 剂 ：4%NaOH 液 、0.1...