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HE染色与免疫组织化学染色实验报告

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华 中 农 业 大 学 动 物 科 技 动 物 医 学 院 第 1 页 共 12 页 HE 染色与免疫组织化学染色实验报告 1 实验目的及意义 1.1 了 解 石 蜡 切 片 的 制 作 过 程 1.2 掌 握 HE 染 色 与 免 疫 组 织 化 学 染 色 的 基 本 原 理 以 及 染 色 方 法 1.3 熟 悉 HE 染 色 与 免 疫 组 织 化 学 染 色 后 的 读 片 知 识 2 实验方法及步骤 2.1 石 蜡 切 片 制 作 及 HE 染 色 步 骤 2.1.1 取 材 与 固 定 : 从 人 或 动 物 新 鲜 尸 体 上 取 下 组 织 块 (一 般 厚 度 不 超 过0. 5 厘 米 )投 入 预 先 配 好 的固 定 液 中 (10% 福 尔 马 林 )使 组 织 、 细 胞 的 蛋 白 质 变 性 凝 固 , 以 防 止 细 胞 死 后 的 自溶 或 细 菌 的 分 解 , 从 而 保 持 细 胞 本 来 的 形 态 结 构 。 2.1.2 脱 水 透 明 : 一 般 用 由 低 浓 度 到 高 浓 度 酒 精 作 脱 水 剂 , 逐渐脱 去组 织 块 中 的 水 份。 再将组 织 块置于既溶 于酒 精 , 又溶 于石 蜡 的 透 明 剂 二甲苯中 透 明 , 以 二甲苯替换出组 织 块 的中 酒 精 , 才能浸蜡 包埋。 2.1.3 浸蜡 包埋: 将已透 明 的 组 织 块 置于已溶 化 的 石 蜡 中 , 放入 溶 蜡 箱保 温。 待石 蜡 完全浸入 组 织块 后 进行包埋: 先 制 备好 容器(如折叠一 小纸盒), 倒入 已溶 化 的 石 蜡 , 迅速夹取已浸透 石 蜡 的 组 织 块 放入 其中 。 冷却凝 固 成块 即成。 包埋好 的 组 织 块 变 硬, 才能在切 片 机上 切 成很薄的 切 片 。 2.1.4 切 片 前的 准备工作 : 先 将包埋的 每块 组 织 周围过 多的 石 蜡 切 去, 四周留约2mm 的 石 蜡 块 , 块 两边必须切 成平行的 直线。 将玻片 擦洗干净后 均匀涂抹薄薄的 一 层蛋 白 甘油, 放置冰箱备用 。 2.1.5 切 片 与 贴片 : 将预 冷的 蜡 块 固 定 于切 片 机上 , 调节切 片 厚 度 为6 微米 , 切 成薄片 。 切 下 的 薄片往往皱折, 放到 加热的 水 中 烫平, 再贴到 载玻片 上 , 放45℃恒温箱中 烘干。 2.1.6 脱...

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