40-免疫分型教程(1) 正常骨髓免疫分型 上图是正常骨髓经CD45、CD71、CD33 染色后组成的 CD45/SSC、CD71/CD33 双参数散点图;通过这两个组合,能够分辨骨髓的正常细胞、检查是否有异常细胞存在、评估细胞的成熟情况。 CD45/SSC 图中可见: 1,CD45 强阳性 SSC 低信号的细胞群为淋巴细胞(褐色细胞群体); 2,中等强度的 CD45 表达,SSC 信号最强的细胞群体为粒细胞(蓝色及红色细胞群体); 3,CD45 表达与 SSC 信号介于淋巴细胞与粒细胞之间的是单核细胞群体(绿色细胞群体); 4,CD45 阴性,SSC 信号最低的有核红细胞和细胞碎片; CD33/CD71 图中可见: 1,CD33 表达最强的单核细胞群体(绿色); 2,粒细胞 CD33 表达较单核弱,不成熟粒表达 CD71,成熟后不表达。 3,淋巴细胞、有核细胞和细胞碎片不表达 CD33、CD71。 CD11B/CD15 图可用来评估髓系细胞向单核、粒分化的程度(随着髓细胞成熟,细胞逐步获得 CD11B,粒细胞高表达 CD15): 1,单核细胞(绿色)高表达 CD11B,CD15 中等到表达; 2,粒细胞(蓝色及橘红色)高表达 CD15,蓝色成熟粒 CD11B 表达较橘红色不成熟粒细胞强,幼稚髓细胞仅表达 CD15 而无 CD11B。 3,T、B 淋巴细胞不表达 CD15、CD11B,NK 细胞表达 CD11B 而无 CD15(红色细胞)。 4,有核红细胞及碎片不表达 CD15 和 CD11B。 根据骨髓细胞 CD45/SSC 图中分布情况设门圈定各类细胞: R1 门为成熟淋巴细胞; R2 门为正常单核细胞位置; R3 门正常粒细胞位置; R4 门为幼稚淋巴细胞出现位置; R5 门为有核红细胞或细胞碎片位置; R6 门为幼稚髓细胞出现位置; 白血病细胞通常会在 R4、R6 两门位置处出现。 M0 免疫分型 M0:急性髓细胞白血病微分化型 原始细胞在光镜下类似L2 型细胞,核仁明显,胞浆透明,嗜碱性,无嗜天青颗粒及Au er 小体,髓过氧化酶(MPO)及苏丹黑B 阳性细胞<3%;电镜下,MPO(+);CD33 或CD13 等髓系标志可呈(+),淋巴系抗原通常为(-),但有时CD7+,TdT+;部分急非淋白血病可表现CD7+,TdT。 形态学:幼稚细胞占骨髓有核细胞90%以上;肿瘤细胞不出现AUER 小体;粒细胞缺少,MPO 或苏单黑染色阴性。 遗传学:染色体常有复杂的异常,特别是 5 和 7 号染色体。当病例伴 T(9;22)时会出现淋系抗原。 幼稚细胞群体的 FS 和 SS 信号低,在CD45/SS 点图中特征性地与幼稚淋巴细胞区域相连。幼稚细胞至少表达一种骨髓抗...