精品文档---下载后可任意编辑ADM 基因转染 MSCs 移植对心衰大鼠心脏功能及心肌重构的影响的开题报告一、讨论背景及意义心衰是心脏病的一种严重形式，是由于心脏功能减弱以致不能满足身体的需要而引起的一系列症状和体征，如气促、疲劳、体重增加等。心衰是世界范围内的一种重要公共卫生问题，其患病率和死亡率不断上升。虽然已有多种治疗方法，包括药物治疗、心脏起搏器、心脏转流术等，但治愈仍是一个难题。干细胞移植治疗心衰是一种新兴的治疗方法。近年来，讨论表明多能干细胞和造血干细胞在心脏再生中的潜在应用价值，但其临床应用仍受到一些限制。因此，讨论成熟的骨髓间充质干细胞（MSCs）作为基因载体，将相关基因导入 MSCs，可大幅度提高移植干细胞的生存率，有效促进心血管再生，改善心衰大鼠心脏功能，从而成为一种潜在的治疗方案。二、讨论目的本讨论旨在探究 ADM 基因转染 MSCs 移植对心衰大鼠心脏功能及心肌重构的影响，并进一步明确其作用机制。三、讨论计划1.实验内容(1)建立心衰大鼠模型：利用连续 6 周冠状动脉狭窄模型制备心衰大鼠模型；(2)分离及培育 MSCs：从大鼠骨髓中分离纯化 MSCs，进行扩增、鉴定及培育；(3)构建 ADM 基因质粒：采纳 PCR 扩增 ADM 基因，将其克隆进入质粒载体中； (4)ADM 基因转染 MSCs：采纳脂质体介导的方法将 ADM 基因质粒转染 MSCs，过表达转染效率；(5)制备 ADM 基因转染 MSCs 移植液：将转染成功的 MSCs 收集制备成移植液；(6)心肌移植：将制备好的 ADM 基因转染 MSCs 移植液直接注射至心肌组织内；精品文档---下载后可任意编辑(7)检测心衰大鼠心肌功能：采纳 M 模式超声心动图仪检测心衰大鼠心脏功能，统计 LVFS、LVEF 值；(8)追踪 MSCs 移植存活情况：采纳荧光素酶体外实验（IVIS）检测MSCs 存活情况；(9)检测心肌重构指标：采纳实时荧光定量 PCR 和 Western blot 检测心肌重构指标基因表达情况。2.实验时间表(1)前期准备工作：2 个月(2)建立心衰大鼠模型及分离 MSCs：2 个月(3)构建 ADM 基因质粒及 ADM 基因转染 MSCs：2 个月(4)制备 ADM 基因转染 MSCs 移植液及心肌移植：1 个月(5)检测心衰大鼠心肌功能和心肌重构指标：1 个月。3.实验预期结果(1)制备成功 ADM 基因载体和 ADM 基因转染 MSCs；(2) ADM 基因转染 MSCs 移植能够显著改善心衰大鼠心肌功能；(3) ADM 基因转染 MSCs 移植具有促进心肌细胞增殖和减少心肌...
