精品文档---下载后可任意编辑leT-7e 对心肌细胞 β1-肾上腺素受体的调控的开题报告概述:心肌细胞 β1-肾上腺素受体在调节心脏肌肉收缩、心脏功能、心血管疾病等方面发挥着重要作用。讨论发现,microRNA let-7e 能够通过靶向 β1-肾上腺素受体 mRNA 3'UTR 区域,调控其表达水平,进而影响心肌细胞的生物学功能。本文旨在进一步探讨 let-7e 在心肌细胞 β1-肾上腺素受体调节中的作用机制。讨论对象:本讨论采纳人类心肌细胞 H9C2 作为讨论对象,利用 let-7e mimics 和 inhibitors 分别干扰其表达水平,观察对心肌细胞 β1-肾上腺素受体表达、cAMP 水平、钙离子动力学和细胞凋亡等方面的影响。讨论方法:通过荧光定量 PCR 检测 let-7e 表达水平,Western blot 和免疫荧光检测 β1-肾上腺素受体表达水平。利用 cAMP 检测试剂盒和荧光定量法检测细胞内 cAMP 水平的变化,钙指示剂 fluo-3、rhod-2 和 confocal显微镜观察钙离子动力学变化。Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide(MTT)法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。预期结果:此讨论预期结果将对 let-7e 在心肌细胞 β1-肾上腺素受体调节中的作用机制有更深化的了解。结果将表明:1)let-7e 表达水平与心肌细胞β1-肾上腺素受体表达水平具有负相关性,2)let-7e 干扰会影响心肌细胞 β1-肾上腺素受体相关分子的表达,导致 cAMP 水平、钙离子动力学及细胞增殖与凋亡等信号通路的改变。本讨论有望为心血管疾病发病机制和治疗提供新思路。