各种微生物生化试验方法原理 通常利用生化试验的方法，检测细菌对各种物质的代谢作用及其代谢产物，称为细菌的生化反应，常用于细菌的鉴别。 1、 糖类分解产物 （1）糖发酵试验（carbohydrate fermentation test）不同种类的细菌对糖的分解利用能力不同，一般以能否分解某种糖，是否产酸产气等现象来鉴别。例如大肠杆菌能分解葡萄糖和乳糖，产酸且产气；而伤寒杆菌只分解葡萄糖产酸不产气，且不分解乳糖。这是因为大肠杆菌分解葡萄糖等产生甲酸，经甲酸解氢酶的作用生成 H2 和 CO2。而伤寒杆菌无此酶，故分解葡萄糖只产酸不产气。 （2）VP 试验（Voges-Proskauer test）产气杆菌将分解葡萄糖产生的两分子丙酮酸脱羧，生成一分子乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气中氧气氧化，生成二乙酰，二乙酰可与培养液中含胍基的化合物（如蛋白胨中的精氨酸）反应，生成红色的化合物，此为VP 试验阳性。大肠杆菌分解葡萄糖不生成乙酰甲基甲醇，故 VP 试验阴性。 （3）甲基红试验（methyl red test）大肠杆菌和产气杆菌均属 G-短杆菌，且都能分解葡萄糖、乳糖产酸产气，二者不易区别。但两者所产生的酸类和总酸量不一：大肠杆菌可产生甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸等，而产气杆菌只产生甲酸、乙醇及乙酰甲基甲醇。故大肠杆菌培养液PH 在 4.5 以下，加入甲基红指示剂呈红色，为甲基红试验阳性；产气杆菌培养液 PH 在 5.4以上，加入甲基红后呈桔黄色，为甲基红试验阴性。 （4）枸橼酸盐利用试验(citrate utilization test） 产气杆菌在以枸橼酸盐为唯一碳源的培养基上生长，分解枸橼酸盐产生 CO2，并转变为碳酸盐，使培养基由中性变为碱性，含溴麝香草酚蓝（BTB）指示剂的培养基由淡绿色变为深兰色，此为枸橼酸盐利用试验阳性。大肠杆菌不能利用枸橼酸盐，故在此培养基上不能生长，培养基仍为绿色。 2、蛋白质及氨基酸的分解产物 （1）硫化氢试验（hydrogen sulfide test） 有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸等）产生 H2S，如遇醋酸铅或硫酸亚铁，能生成黑色的硫化物，为硫化氢试验阳性。本试验常用于区别肠道杆菌的种类。沙门氏菌属通常为阳性;大肠杆菌、产气杆菌、志贺氏菌为阴性。 （2）明胶液化试验（gelatin liguefaction test） 有些细菌具有明胶酶，能分解明胶使其失去凝固能力而液化。变形杆菌、霍乱弧菌、绿脓杆菌、枯草杆菌等能液化明胶；大肠杆菌、沙门氏菌则不能。 （3）吲哚...
