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PTEN在大鼠脑缺血再灌注损伤中影响神经细胞存活通路中的重要作用的开题报告

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精品文档---下载后可任意编辑PTEN 在大鼠脑缺血再灌注损伤中影响神经细胞存活通路中的重要作用的开题报告开题报告一、讨论背景缺血性卒中是世界范围内一个严重威胁人类健康的疾病。在脑血管疾病中,缺血性卒中病死率和致残率最高,且发病率呈年轻化趋势。目前,缺血性卒中治疗的主要手段为溶栓和机械性血管通路重建,但其治疗的成功率有限,且可能引起相关的严重副作用。因此,探究缺血性卒中的分子机制,找寻更好的治疗方法,尤其是针对缺血性卒中后神经细胞保护和修复的途径,具有极其重要的临床意义。磷酸酯酶 PTEN 是 PI3K/Akt 信号通路的重要负调节因子,其通过抑制 Akt 信号通路发挥神经保护作用。已有讨论表明 PTEN 在缺血性心脏病和小鼠脑缺血性损伤中起重要作用,但 PTEN 对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响尚未得到明确的认识。因此,该讨论旨在探究 PTEN 对大鼠脑缺血再灌注损伤中神经细胞的存活通路的影响。二、讨论内容和方法1. 实验设计本实验采纳大鼠脑缺血再灌注损伤模型,建立 PTEN 突变大鼠模型和 PTEN 基因敲除大鼠模型,进行神经细胞存活通路相关基因表达及 Akt 信号通路调控的讨论。2. 方法(1) 大鼠脑缺血再灌注损伤模型的建立:采纳 BCA 注射法将供应大脑的颈动脉夹闭 90 分钟,再行 24 小时再灌注,建立大鼠缺血再灌注模型。(2) PTEN 突变大鼠模型的建立:采纳 CrispCas9 基因编辑技术,选择合适的 sgRNA 片段,进行 PTEN 基因的突变。(3) PTEN 基因敲除大鼠模型的建立:采纳 CRISPR/dCas9-SAM 技术,针对 PTEN 基因的启动子区进行敲除。(4) 分子生物学方法:进行基因表达相关分子生物学实验,包括实时荧光定量 PCR (RT-qPCR)、Western blot 分析等。精品文档---下载后可任意编辑三、讨论意义和价值通过本实验的实施,可以更全面地了解 PTEN 在大鼠脑缺血再灌注损伤中对神经细胞存活通路的影响机制,探讨其与 Akt 信号通路之间的关系,从而为开发缺血性卒中的更好治疗方法提供科学依据。同时,本讨论有助于进一步探讨信号通路调控神经细胞生死对策略,在全面提高脑部神经细胞的存活能力、缓解缺血再灌注损伤、以及治疗缺血性卒中方面提供新的思路和方法。

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