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抗生素的生物效价测定法管碟法

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精品文档---下载后可任意编辑测定抗生素效价的方法比较多,一般可以分为物理学方法、化学方法、生物学方法、和两种方法配合等四大类,可根据具体情况选择使用。生物学方法以抗生素的杀菌力作为衡量效价的标准,其原理恰好和临床应用于的要求一致这是它的优点;又其灵敏度较高,需用检品的量较小,也是其它方法所不及的。抗生素的生物效价测定法,常用的有稀释法、比浊法和扩散法(或称渗透法)。稀释法 这一方法是用培育基将检品抗生素稀释到各种浓度,并依次分装到一系列的容器内,再加入等量“试验菌种”菌种菌液,并放在 37 ℃ 保温箱内培育一定时间,观察何种稀释度适能抑制细菌的生长,该稀释度即为测定终点(或以细菌生长所引起的 PH 改变及溶血现象等生化反应作为测定终点),再与同样处理的标准抗生素的终点作比较,即可求得检品的效价。这种方法可以使用液体培育基,也可以使用固体培育基。所用的材料及培育基都必须严格无菌,并要注意无菌操作。由于测定终点是以有无细菌生长来推断的,因此所得结果公是一个范围。比浊法 原理及操作大致与稀释法相同。比浊法也是将不同量的检品及标准品分别加入培育基中,观察其对“试验菌种”的效应——即细菌生长所引起的混浊。这一方法和稀释法的区别有二:a.比浊法的稀释间隔的密度比较近,准确度高一些;b.比浊法不以细菌有无生长的区分为终点,而是将标准品浓度和细菌生长所引起的混浊度求得一定的比例,再由检品的细菌生长混浊度推算检品的效价。这一方法易受杂质的影响,并且不适用于有色或混浊的检品。扩散法 使用固体培育基,在培育基凝固以前将“试验菌种”混合进去,在这样备妥的培育表面,可以用种种设计使检品液或含有抗生素的物质与有菌种的培育基接触。经过培育后,由于抗生素向培育基中扩散,凡抑菌浓度所能达到之下细菌不能生长因而形成透明的抑菌范围,此种范围一般都呈圆形,称为“抑菌圈”。扩散法有几种,或中一种叫管碟扩散法(筒称管碟法)为国际上常用的方法,在我国也作为法定的抗生素检定法。下面我们将详细地讨论管碟法的原理和实验方法。一、管碟法测定的设计原理及计算方法管碟法所用的管子系用瓷、铝或玻璃制成,较好的用不锈钢制成,它是内径为 6+0.1 毫米、外径为 8+0.1 毫米、高 10+0.1 毫米的圆筒形管子,管子的重量尽可能相等。摊布固体培育基的容器可用双碟,亦可用平底下班盘。管子放在混有菌种的固体培育基上时,可用人工放置,也可用特定的管子放...

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