微生物检验技术考试要点(整理中级)

1 检验技术资格考试考点精要——微生物学检验（中级） 1. 生物学按界门纲目科属种分类，种是最小单位。病毒分类：目、科、亚科、属、种。属名--VRirus结尾的单词,亚科名--VRirinae 结尾的单词,科名--VRiridae 结尾的单词。目名—VRirales。2004 年 ICTV公布病毒分为：73 个科、11 个亚种、289 个属。 2. 结核菌可利用甘油为碳源，梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源，流感嗜血杆菌要Ⅴ，Ⅹ因子才能生长。 3. 药物敏感试验：纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用单片纸碟法、试管稀释法（以抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点，该管含药浓度为最低抑菌浓度 MIC 或最低杀菌浓度 MBC），两值越低则表示越敏感。MIC 与抑菌圈呈负相关，即抑菌环直径越大，MIC 越小。 各药敏纸片间距不少于24mm，距平板内缘不小于15mm。 药物敏感实验判定标准 ：抑菌圈直径（毫米）：20 以上极敏、15~ 20 高敏、10~14 中敏、10 以下低敏。不同的菌株、不同的抗生素纸片需参照NCCLs 的标准或者CLSI 标准。 多黏菌素抑菌圈；在9 毫米以上为高敏，6—9 毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。 4.常用的免疫技术：酶免疫技术（EIA）、协 同凝 集 试验、免疫荧 光 技术（IF）、对 流免疫电 泳 （CIE）、免疫印 迹 技术。 5.病原 菌核酸的检测 ：核酸杂 交 、PCR 技术、基因芯 片技术。 PCR 技术—是选 择 DNA 或 RNA 体 外 扩 增 技术，用标本 提 取 DNA 为扩 增 模 板，选 用一 对 特 异 寡 核苷 酸为引 物，PCR 一 般 要经 历 三 十 多次 循 环，经 不同温 度变 性 93-94℃ （作 用 1min 氢 键 断 裂 形 成 单链 DNA）、退 火40-60℃ （迅 速 冷 却 30-60s 引 物与 DNA 模 板结合 ，形 成 局 部 双 链 ）、延 伸 70-75℃ （在TaqDNA 聚 合酶作 用下，以 A、T、G、C 四 种脱 氧 核苷 酸为原 料 ，从 引 物 5’ → 3’ 端 延 伸 ，合 成 与模 板互 补 的 DNA 链 。），扩 增 产 物用溴 乙 啶 染 色 的凝 胶 电 泳 。其 具 有 特 异 、快 速 、灵 敏、特 异 性 强 、操 作 简 便 、能够 定量 。引 物是PCR 特 异 性 的决 定因素，PCR 反 应 中 TaqDNA 聚 合 酶、引 物加 量 过 多，可引 起 非 靶 序 列 扩 增 。 变 性 DNA 常发 生一 些 理 化 及...