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微生物限度检验操作规程(2015年版)

微生物限度检验操作规程(2015年版)_第1页
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1 目的 规范微生物限度检验操作,确保检验结果准确、可靠。 2 依据 《中国药典》2015 版。 3 范围 本标准适用于微生物限度检验。 4 责任 中心化验室负责人:对本规程的实施负责。 中心化验室检验人员:严格按照本规程执行检验操作。 5 程序 5.1 执行标准:《中国药典》2015 版。 5.2 抽样:照《取样标准操作规程》进行。 6 内容 6.1 需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数 计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和最可能数法(MPN 法)。检查时,按已验证的计数方法进行供试品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的测定。 6.1.1 设备、仪器及用具 6.1.1.1 设备 微生物限度检测室、净化工作台、生化培养箱(30~350C)、生化培养箱(20~250C)、电热恒温水浴锅、烘箱、脉动真空灭菌柜、紫外灯等。 6.1.1.2 仪器及器皿 显微镜、托盘天平、锥形瓶、研钵、培养皿、量筒、试管及塞、移液枪及吸头、薄膜过滤器等。 6.1.1.3 用具 大、小橡皮乳头,洁净工作服、口罩、医用手套、接种环、酒精灯、酒精棉球、灭菌剪刀、灭菌镊 子 、不 锈 钢 药匙 、试管架 、火 柴 、记 号 笔 、薄膜过滤膜等。 6.1.2 试液 6.1.2.1 消 毒 液 A. 0.1% 新 洁尔 灭溶 液 B. 75%乙 醇 溶 液 6.1.2.2 稀 释 液、试剂 及配 制 A. pH7.0无 菌 氯 化 钠 -蛋 白 胨 缓 冲 液 : 取 磷 酸 二 氢 钾 3.56g、 无 水 磷 酸 氢 二 钠 5.77g、氯 化 钠 4.3g、 蛋 白 胨 1.0g, 加 纯 化 水 1000ml, 微 温 溶 解 , 滤 清 , 分 装 , 1210C灭 菌 15分 钟 。 B. 聚 山 梨 酯 80 C. 无 菌 十 四 烷 酸 异 丙 酯 D. pH6.8无 菌 磷 酸 盐 缓 冲 液 6.1.3 培 养 基 胰 酪 大 豆 胨 琼 脂 培 养 基 、 胰 酪 大 豆 胨 液 体 培 养 基 、 沙 氏 葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基 6.1.4 操 作 方 法 6.1.4.1 试 验 前 准 备 6.1.4.1.1 将 供 试 品 及 所 有 已 灭 菌 的 平 皿 、 锥 形 瓶 、 试 管 、 移 液 枪 吸 头 ( 1ml、 10ml) 、量 筒 、 稀 释 液 、 培 养 基 等 移 至 传 递 窗 内 。 每 次 试 验 所 用 物 品 必 须 事 先 计 划 , 准 备 足 够 用 量 ,避 免 操 作 中 出 入 操 作 间 。 6.1.4.1.2...

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