前 言 植物组织培养是园艺技术专业技能训练课程之一,是遵循高职教育规律,坚持以服务为宗旨,就业为导向,进行教学改革,是以2008年教学大纲为基础,将组织培养以工作过程分解能力培养体系,按工作任务模块进行了调整和修改,注重加强理论与实践的结合,在掌握“必需、够用”的组培基本理论同时,能够进行娴熟的植物组织培养操作,充分利用校外实习基地与学校组培实训基地,采取“校企一体、工学结合”,并以真实项目为载体,在教师指导下,以学生为主体实现项目,做到“项目驱动,学做一体”的教学特色,使学生完全符合植物组织培养岗位的职业要求,培养学生的组织培养岗位职业能力,满足学生在浙江大学试验农场、连云港振兴恒巨生物有限公司、三益集团实习就业需求。 植物组织培养技能训练教程 1 第一部分:组织培养常用仪器设备使用及维护 1 —1 高压蒸汽灭菌锅的使用及维修 1 原理 高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。从而使沸点增高,得到高于 1 0 0 ℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 2 使用方法 (1)装锅:先在外锅加入适量的水,然后将灭菌物品直立放入内锅,试管口或三角瓶口向上且不要贴锅边,避免冷凝水浸入试管或三角瓶。灭菌物品不要装得太满,留出一定空间,便于蒸汽流通,否则易造成灭菌不彻底。 (2)盖上锅盖:盖锅盖时应将锅盖上的排汽管插入锅内壁管孔内,然后对角线方向拧紧锅盖上的螺丝,并将放汽阀直立打开,安全阀横向关闭。 (3)排放冷空气:将灭菌锅放在电炉上加热,当锅内蒸汽大量排出时再继续排汽 3~5 min,关闭放气阀。 (4)升压、保压、降压:当压力表指针指到 1.05 kg/cm2处时(灭菌所需压强)开始计时,继续维持该压强20~30min。灭菌结束待压力表指针自然回到“0”位时打开放汽阀,排出锅内剩余蒸汽后,打开锅盖。注意切忌在压力表未到“0”位时就放汽,以免试管内的培养基向上冲浸湿棉塞,造成以后菌种的污染。 植 物 组 织 培 养 技 能 训 练 教 程 2 1 —2 超净工作台 超 净 工 作 台 是 为 实 验 室 工 作 提 供 无 菌 操 作 环 境 的 设 施 , 以 保 护 实 验 免 受 外 部 环 境 的 影响 , 同 时 为 外 部 环 境 提 供 某 些 程 度 的 保 护 以 防 污 染 并 保 护 操 作 者 。 1 原 理 超 净 ...