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白血病及淋巴瘤免疫分型

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白血病及淋巴瘤免疫分型 正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中,细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现、表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关,而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特异性。因此,这些抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。白血病是造血系统的恶性肿瘤,在形态上变化虽相当大,但仍能表达正常血细胞所具有的抗原,因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病进行免疫分型。由于白血病细胞具有肿瘤细胞的特征,其抗原表达又不完全同于正常血细胞,常可出现某些抗原缺乏、过度表达、系列交叉表达某一系列或阶段不应有的抗原,这又增加了白血病免疫分型的复杂性。 近年来白血病/淋巴瘤的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。早年曾用过的荧光显微镜或 APAAP 方法基本被废弃。国际上公认的通用的方法是流式细胞术( FCM)。流式细胞术(FCM)白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体(McAb)作分子探针,多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型,由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。因为 FCM 能快速,多参数,客观的定性又定量测定细胞膜,浆,核的抗原表达。另一个重要理由是至今尚未发现白血病/淋巴瘤的特异抗原。所以能用正常血细胞的单抗来进行免疫分型是基于白血病形成的分化阻断学说即白血病细胞基因异常,分化受阻于某阶段形成不同亚型的白血病。这群细胞充盈于骨髓。抗原表达与其相应系列/阶段的血细胞无明显差异。与形态学检查相似仅能根据数量的差异来判断病变细胞的属性。单参数免疫标志测定易将正常细胞包括在内。因此,近年来主张用设门(gating)方法。即用 CD45 与侧向角(side scatter,SSC),对数取样后可将骨髓细胞清晰地分出淋巴细胞,单核细胞,成熟粒细胞,幼稚细胞和红细胞群,其理论依据是 CD45 是所有白细胞的抗原。其表达量在淋巴细胞最高,单核细胞,成熟粒细胞,早期造血细胞(blasts)依次减弱。红细胞(中,晚幼红细胞,成熟红细胞)不表达 CD45。SSC 反映细胞的颗粒性,成熟粒细胞SSC 最高,依次为单核细胞,淋巴细胞,blasts,红细胞。以 CD45/SSC 双参数,对数取样时即可把各细胞群区分出来。若同时加上一个,二个甚或三个荧光标记的单抗,则很容易识别非正常细胞群所表达的抗原。这样可以排除正常细胞的干扰。在幼稚细胞%低的情况下或检测残存白血病时尤为必要 。FCM 分析白血病免...

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