四 血液临床酶学诊断 1 血清酶的总活性测定 酶是由组织细胞合成的具有特殊催化功能的蛋白质,是对化学反应具有强化的催化性,对作用物由严格选择性的生物催化剂。酶的活性是对酶的催化能力大小的度量。酶活性的测定就是酶催化某一化学反应的反应速度。由于酶是蛋白质,其催化的反应速度受温度,PH,离子强度,底物浓度等多种因素的影响,故酶的活性都是用在特定条件下,单位时间内,酶促反应中低物的消耗量或产物的生成量来进行测定。 酶活性的测定采用手工或自动生化分析仪的两种方法进行测定。自动生化分析仪分为半自动分析仪和全自动分析仪两种。半自动分析仪由手工完成样品及反应混合体递送,部分操作由仪器自动完成。全自动生化分析仪则是从加样到出结果的全过程完全由仪器自动完成。按仪器复杂的程度及功能分类分为小型,中型,大型自动分析仪。小型一般分为单通道,中型为多通道,常同时可测 2-10 各项目,大型多通道的仪器可同时测 10 个以上项目,分析项目可自由选择。 MD-100 型半自动分析仪简介: 本仪器是由美国Sy smtey 生化仪器公司生产。该仪器采用单一通道,可连程测试20 个以上的项目。该仪器主要分为计算机控制系统,吸样泵,光学系统比色池三个部分。 MD-100 型半自动分析仪操作: 〈1〉接通电源,约30 分钟。 〈2〉用专用清洗液或自配3%84 消毒液清洗仪器。如仪器久未使用需打开仪器侧小门,取下吸样泵小管,用注射器来回推入清洗液,清洗吸样通道。 〈3〉进入所测项目的界面,点击轻轨鼠标右键编辑项目参数。 〈4〉点击轻轨鼠标左键进入运行项目。 〈5〉按仪器提示的方法进行下一步操作,依次吸取空白试剂、标准试剂、样本试剂测试。 〈6〉本项目测试完毕,需用专用清洗液或自配3%84 消毒液清洗。 〈7〉退出项目测试,在根目录下关闭电源。 乳酸脱氢酶(LDH-L)测定 a 原理 L-乳酸+NAD 正离子——→丙酮酸+NADH+氢离子 b 试剂 原装诊断试剂盒 c 方法 取一定量的 R2(Tris 缓冲液PH8.9,100mmol/L;KCl 100mmol/L;L-乳酸锂 52mmol/L)加入R1(NAD 6.5mmol/L)轻轻摇动,并倒置几次,完全溶解后,即为工作液。 空白管 样品管 工作液 1.00ml 1.00ml 蒸馏水 0.02ml ------ 样品 ------- 0.02ml 混合均匀,在 37℃保温 30秒钟,读取初始吸光度(波长 340nm),同时开始计时,在精确的 1,2,3分钟时,分别读取吸光度,确定每分钟平均吸光度的变化(△A/分) d 上机...