芽孢杆菌分离筛选与培养

1 芽孢杆菌分离筛选与培养 枯草芽饱杆菌是芽饱杆菌属的模式种，很少成链，通常为0.7~0.8μm×2.0~3.0μm，营养细胞杆状，杆端钝圆，单生或成短链，能运动，革兰氏染色一致呈阳性，芽孢中生或偏生，芽孢呈椭圆或长简形。无荚膜，周生或侧生鞭毛，游离孢子表面着色弱，菌落形态变化较大，粗糙，表面干燥，不透明，灰白色或微带黄色，扩散（蔓延）生长。斜面丰厚粗糙，不透明，蜡质蔓延，奶油色至微褐色。在液体培养基表面形成银白色较厚的具皱纹的菌膜。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，广泛分布在土壤、水体及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖。 琼脂培养基上的菌落圆或不规则形，表面色暗，变厚和不透明，可起皱，可呈奶 油色或褐色，菌落的形状随培养基成分不同而有很大变化。当琼脂培养基表面潮 湿时，菌落易于扩散。在琼脂培养基上生长的菌苔在液体中不易扩散。在培养液 中生成色暗、皱褶、完整 的膜，培养液轻 度 混 浊 或不混 浊 。有氧 时生长旺 盛 ，在 含 有葡 萄 糖的复 杂 培养基中可进 行 厌 氧 代 谢 ，但 其 生长和发 育 都 较弱，生长温 度 最 高 为45~55℃ ，最 适 为37℃ 。 枯草芽孢杆菌生理 生化特 性： 液化明胶 冻 化牛 乳 还 原 硝 酸 盐 不产 生吲 哚 ，硫 化氢 V-P 反 应 阳性，水解 淀粉。葡 萄 糖发 酵 产 酸 不产 气 ，需 氧 。 地 衣 芽孢杆菌孢囊 不膨 大，无伴 孢晶 体，中生卵 圆型 芽孢，周围 鞭毛， 无 荚 膜 。 革 兰 氏 液 染 色 呈 紫 色 阳 性 菌。 细 胞 大 小 一 般 在 0.9~1.2×2.2~3.8 微米 。菌落呈灰白色、边 缘 不整 齐 的扁 平 菌落。 1.样 品 ： 外 购 菌种 商 品 微生物制 剂 （固 体或液体） 土壤水体或枯枝 烂 叶 ，腐烂 稻 草（记 录 取 样 位 置 PH 植 被 情 况 等 ）。 2.菌种分离与纯 化 2.1． 培养基 2.1.1 可溶 性淀粉 3g/L 蛋白胨 10g/L 酵 母 膏 3g/L KH2PO41.5g/L K2HPO42g/L MgSO4 0.1g/L PH 7.4— 7.6 （富 集 用） 2.1.2 肉 汤 （NA）培养基（营养琼脂）： 蛋白胨 10g/L 牛 肉 膏 3-5g/L NaCl5g/L PH7.2— 7.4（保 存 计 数 或分离纯 化用） 营养琼脂： 麦 芽汁培养基=1： 1 混 合 使 用，菌落不易扩散，形态特 征 典 型 2.1.3 蛋白胨 10g/L 酵 母 膏 5g/L 葡 ...