菌种传代操作规程 GMP 管理文件 题 目 菌种传代操作规程 编码： 页序/ 总页 1/2 制 定 审 核 批 准 制订日期 审核日期 批准日期 颁发部门 质量部 生效日期 分发部门 化验室 一、 目的：为使菌种传代操作法律规范化、制度化，故建立此规程 二、 适用范围：菌种传代须按本规程执行
三、 责任者：微生物限度检查化验员，质量检测中心主任
四、 正文： 1、培育基的制备 按微生物限度检查用稀释剂、培育基配制操作规程及斜面配制操作规程配制好相应培育基
大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、沙门菌、用胰酪大豆胨琼脂斜面培育基，白色念珠球菌、黑曲霉用沙氏葡萄糖琼脂斜面培育基，制备好的培育基预培育 48 小时后，确认无菌落生长方可使用
菌种传代 菌种传代前应准备好适于该菌种生长的培育基和培育设备，所有操作均应在符合生物安全保护的生物安全柜内进行
点燃酒精灯，在火焰上部操作，将原有的菌种斜面（简称菌种管）与待接种的新奇斜面培育基（简称接种管）持在左手拇指、食指及中指之间，菌种管在前，接种管在后，使试管内斜面对上，两支试管口平齐，应斜持试管呈 45°角，以免管底凝集水浸湿培育基表面
用右手在火焰旁转动两支试管胶塞，以便接种时易于拨取
再用右手持接种环的柄端，垂直或稍斜地把接种环在火焰上灼烧
将接种环烧红约 30s，随后将接种棒金属部分在火焰上烧灼，以彻底灭菌
用右手的小指和手掌之间以及无名指与小指之间，在火焰旁分别拔除两支试管的胶塞，持住
在将试管口在火焰上通过以杀灭管口的细菌，但勿烧的过热，将烧灼的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培育 GMP 管理文件 题 目 菌种传代操作规程 编码： 页序/总页：2/2 基上，如有溶印则表明接种环未冷却，待冷后，再从斜面上挑取少许菌苔
取出时接种环不能通过火焰，应在火焰旁迅速插入接种管，在斜面上由下而上划
