Bac_to_bac表达系统中文版说明书VIP专享

Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统试剂盒容物：Introduction：Overview：Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统提供快速有效的方法产生重组杆状病毒。此方法基于让已经转入杆状病的质粒（杆粒）的位点特意转座子的表达框的质粒在 Ecoli 中扩增。Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统主要包括：*pFastBac 捐献质粒的选择，它要能够产生包含目的位点的表达结构，这个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子控制。*一个 Ecoli 宿主，DH10Bac，包含杆状病毒质粒（杆粒）和辅助质粒，在转染 pFastBac 表达结构后可以产生重组杆粒。*一个控制表达的质粒，包括 Gus 和/或 CAT 基因，以便在感染细胞后产生重组杆状病毒，表达 β-葡萄糖酸酐酶和/或氯霉素乙酰转移酶。Bac-to-Bac 表达系统的优点：使用这个系统产生重组杆状病毒较传统的同源重组有以下优点：*与使用同源重组产生重组杆状病毒所需的 4-6 周相比，鉴别纯化重组病毒少于两周*减少了从斑点筛选重组病毒 DNA 所包含亲缘和非重组病毒的几率*可以快速同时进行大量重组，适合表达功能性讨论的蛋白选择 pFastBac 菌体（Vector）：大量的 pFastBac 菌体都适于进行 Bac-to-Bac 表达系统。选择对于你的需要最适宜的菌体。Vector特点参考pFastBacTM1高 水 平 表 达 的 强 AcMNPV聚乙烯（PH）启动子用于简单克隆的大量克隆位点Anderon 1996pFastBacTMHT高水平表达的聚乙烯启动子；N-末端含有 6XHis，可以用Polayes 1996来纯化重组蛋白，并可用TEV 蛋白酶切去；提供 3 个阅读框pFastBacTMDual两 个 强 启 动 子 （ PH 和p10）可以同时表达两种蛋白；两个大的克隆位点Harris 和 Polaye 1997指南用途：指南提供了一个对于 Bac-to-Bac 表达系统的概述，并对以下提供指导：1、克隆目的基因到 pFastBacTM供体质粒的选择2、转化 pFastBacTM 结构到最高效的 DH10BacTM产生重组质粒3、转染重组质粒 DNA 到昆虫细胞产生重组杆状病毒4、扩增滴定（Amplify and titer）杆状病毒株，使用病毒株感染昆虫细胞表达目的重组蛋白重要的：Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统是用来帮助你产生重组杆状病毒，在昆虫细胞中进行高水平表达目的基因的系统。虽然他可以帮助你很容易的产生杆状病毒表达你的重组蛋白，但是使用这系统更倾向于有杆状病毒生物学和昆虫表达背景的使用者。我们高度推举使用者具有病毒和组织培育的技术和知识。Bac-to-Bac 表达系统表达系统的成分：表达系统简单高效的产...