B.1 三步法 急性毒性 (口饲) –急性毒性等级方法1. 方法1.1. 引言急性毒性分级方法给危险性评估和危险性分类提供信息。基于研究的结果,这种方法使用三份固定的剂量使一个化合物被足够地分开以至能够分类。 此外，在这一个测定方法中被描述的实验步骤允许选择使用三个附加的固定剂量。它们可以也被当作假设结论的选项，又可以用作更进一步的选项。在更进一步的改良值得去做或需要去做的情况下，我们将考虑附加药剂的使用。方法使用定义了初始剂量，但这并不意味着计算精确可达到 LD50。相反，由于动物样品的死亡是整个实验的终点，当死亡可以预料时，超出一定范围的剂量也是允许的。 实验的结果应该允许根据附件Ⅵ 标准来分类。依据这种方法持续性，测定的时间可以比B.1 中描述的要长。这种方法的主要优点是，它所需的动物数量比急性毒性（口饲）（B.1）和选择性固定剂量方法（B.1 两步法）要少。也见一般引言 B 部分 。1.2. 定义见一般引言 B 部份。1.3. 测定方法原理对一组实验动物通常使用一种改良了的剂量，使用渐进的实验步骤来测定实验物质的性质。每一步使用同性别的三只动物。没有必要进行实验前的光照研究。关系到动物死亡率的物质缺少或存在的剂量使用取决于上一步的剂量，例如：-没有必要进行更深一步的测定-下一步，药剂的剂量没有改变，但被用于另一种性别的动物-下一步，将使用下一个更高或更低的剂量水平1.4. 测定方法的描述1.4.1. 准备阶段随机选取健康年轻的动物，标上记号以示区别，为了让它们熟悉环境，还得在测定前五天把它们关进笼子里。这些动物可以根据性别和剂量水平进行划组归笼，但每个笼子里面动物不能太多以至干扰了对每个个体的清晰观察。测定物质以确定的剂量用胃管或插管强食地注入动物体内。如果需要，测定物质要被溶解或悬浮在合适的媒介物质中。建议只要可能的话，首先考虑用水，再考虑用油或其他媒介物。对于非水溶性测定物，在测定前必须知道或确定媒介物的毒性。动物在使用剂量前应该禁食；但水要保证供给。1.4.2. 测定条件1.4.2.1. 测定动物除非有禁忌症，一般老鼠是常用的啮齿动物。雌性必须是未生育的和没有怀孕的。在研究的开始阶段，每种性别的体重差别不得超过平均水平的20%。1.4.2.2.数量和性别每一步骤用同性别的三只动物. 在开始，性别可以任选。1.4.2.3.剂量水平使用的初始剂量是从三个确定的水平里选择的，如 25, 200 和2000mg/kg .而且初始剂量应该有利于导致部分样...
