α-葡聚糖酶制糖工业论文 １ α-葡聚糖酶的讨论 １．１组成型 α-葡聚糖酶工程菌的构建及表达讨论 梁达奉等克隆了朱黄青霉（ＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｍｉｎｉｏｌｕｔｅｕｍＨＩ-４）的 α-葡聚糖酶基因ｄｅｘ，构建组成型表达载体ｐＧＡＰＺ α Ａ-ｄｅｘ；还以毕赤酵母ＫＭ７１Ｈ为受体菌构建了组成型表达 α-葡聚糖酶的毕赤酵母工程菌ＫＭ７１Ｈ／ｐＧＡＰＺ α Ａ-ｄｅｘ
他们的讨论结果显示，摇瓶发酵１２０ｈ，α-葡聚糖酶酶活达到６０．４Ｕ／ｍＬ
且该菌种培育方法简单，遗传特性稳定，在发酵过程中无需诱导，避开了甲醇的使用，这不但提高了安全性，还降低了成本，为大规模工业生产 α-葡聚糖酶打下基础
１．２酶学性质及其稳定性讨论 黎志德等讨论了ＫＭ７１Ｈ／ｐＧＡＰＺ α Ａ-ｄｅｘ所产 α-葡聚糖酶的酶学性质
结果表明，α-葡聚糖酶的最适反应温度为５０℃，最适反应ｐＨ值为５０；酶的储存稳定性较好，ｐＨ值在４．５～５．０时 α-葡聚糖酶较稳定，４℃保存，半衰期约为３５ｄ
他们发现：采纳葡萄糖作保护剂可以最大限度减少酶活损失，以蔗糖作为保护剂时，在室温下酶活基本没有损失；α-葡聚糖酶在ｐＨ值５．５时，温度４～２５℃保存１５０ｈ，相对酶活仍有９０％以上；但是当贮存温度超过３０℃，酶活在较短时间明显下降，且温度越高，酶活下降速度越快；α-葡聚糖酶在ｐＨ值４～６，４℃下保存一周，相对酶活仍有８０％以上；α-葡聚糖酶液中添加甘油浓度达到３０％时，室温下保存５６ｄ，相对酶活仍有８０％以上
１．３分离纯化讨论 黎志德等讨论了 α-葡聚糖酶在ＰＥＧ-（ＮＨ４）２ＳＯ４双水相体系中的分配行为，并从中寻找该双水相体系中分离纯化的最佳工艺条件
他们以两相比酶活、蛋白浓度、比活力以及萃取率为参数进行比较，探讨使用不同分子量的ＰＥＧ、不同的ＰＥＧ浓度以及不同（ＮＨ４）２ＳＯ４浓度下对酶分配行为的影响发现，α-葡
