葡萄糖苷酶水解苦丁茶叶中黄酮糖苷的工艺探究

橡胶籽 β-葡萄糖苷酶水解苦丁茶叶中黄酮糖苷的工艺探究摘 要苦丁茶中含有丰富的黄酮类物质，具有重要的生理活性，而这些生理功能主要由苷元来发挥，而苷元含量占比很小，所以造成了黄酮资源的浪费。因此需要探究一种方法将苦丁茶中的黄酮糖苷转化为黄酮苷元。本课题研究了三种市面常见的冬青科苦丁茶苦丁茶冬青、大叶冬青和枸骨中黄酮的最佳提取工艺，橡胶籽β-葡萄糖苷酶对三种苦丁茶黄酮提取液中黄酮糖苷的最佳水解工艺，水解前后三种苦丁茶黄酮提取液清除自由基和抑菌能力。三种苦丁茶中黄酮含量差异较大，其中苦丁茶冬青中含量最高，响应面优化最佳提取工艺为：提取时间为 2h、料液比 52mL/g 、乙醇浓度为 61%，其总黄酮得率为 2.18%；大叶冬青次之，响应面优化最佳提取工艺为：提取时间为 2h、料液比54mL/g 、乙醇浓度为 64%，其总黄酮得率为 1.86%；枸骨中黄酮含量最少，响应面优化最佳提取工艺为：提取时间为 1h、料液比 60mL/g 、乙醇浓度为 60%，其总黄酮得率为 0.208%。橡胶籽 β-葡萄糖苷酶酶解苦丁茶冬青黄酮提取液的最佳条件为：加酶量为 4U/mL，酶解时间为 6h，酶解温度为 45℃。酶解后，槲皮素含量由 0.52ug/mL 提升到 1.39ug/mL，山奈酚含量由 2.01ug/mL 提升到 2.06ug/mL，异鼠李素含量由0.98ug/mL 提升到 1.43ug/mL；橡胶籽 β-葡萄糖苷酶酶解大叶冬青黄酮提取液的最佳条件为：加酶量为 4U/mL，酶解时间为 5h，酶解温度为 45℃。酶解后，槲皮素含量由 1.02ug/mL 提升到 1.47ug/mL，山奈酚含量由 1.79ug/mL 提升到 2.52ug/mL，异鼠李素含量由 0.72ug/mL 提升到 1.21ug/mL；橡胶籽 β-葡萄糖苷酶酶解枸骨黄酮提取液的最佳条件为：加酶量为 5U/mL ，酶解时间为 7h，酶解温度为45℃。酶解后，槲皮素含量由 0.35ug/mL 提升到 0.63ug/mL，山奈酚含量由0.55ug/mL 提升到 0.81ug/mL，异鼠李素含量由 0.76ug/mL 提升到 1.16ug/mL。三种苦丁茶黄酮提取液的酶解液对 DPPH 自由基、羟基自由基和 ABTS 自由基的清除能力均强于非酶解液。且在 1~15ug/mL 的浓度范围内，苦丁茶冬青及大叶冬青的黄酮提取液及其酶解液对三种自由基的清除能力随着浓度的提升而逐渐增大。且当浓度大于 4ug/mL 时，两者对 DPPH 自由基的清除能力强于同浓度下的 Vc 溶液。枸骨黄酮提取液及其酶解液在 1~9ug/mL 的浓度范围内，其清除自由基的能力与浓度成正相关。当浓度大于 6ug/mL 时，其酶解...