DPPH和ABTS、PTIO自由基清除实验-操作图解-李熙灿-Xican-LiVIP专享

DPPH•和 ABTS+•自由基清除实验（含 PTI0•自由基清除实验）：详细说明与疑难解答李熙灿（广州中医药大学中药学院,2019.7）(以下内容系来源于实验经验及三个参考文献[1]Li,X.,ComparativeStudyof1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazylRadical(DPPH・)ScavengingCapacityoftheAntioxidantXanthonesFamily.Chemistryselect,2018.3,13081-13086.[2]Li,X.;Ouyang,X.;Cai,R.;Chen,D.3',8”-DimerizationEnhancestheAntioxidantCapacityofFlavonoids:EvidencefromAcacetinandIsoginkgetin.2019,Molecules.24,2039.[3]Li,X.C.,2-Phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl3-0xide(PTI0・)RadicalScavenging:ANewandSimpleAntioxidantAssayInVitro.J.Agric.FoodChem.,2017.65,6288-6297【概述】DPPH・、ABTS+・、PTIO・自由基三者，都是常用的自由基。概述如下表:DPPH•自由基ABTS+•自由基PTI0•自由基结构式Q?2>v◎O2N®阶户°沾—0QN—*简单表达式DPPH・ABTS•+PTIO・分子式与分子量C18H12N5O6；M-W-394-3C18H24N6°6S；M.W.548.68C13H17N2O2;M.W.233.3带电情况中性自由基阳离子自由基中性自由基种类氮自由基（成单电子在 N 原子上）氮自由基（成单电子在 N 原子上）氧自由基（成单电子在 0 原子上）外观紫黑色粉末没有纯的 ABTS•+紫褐色粉末溶解性与溶液颜色溶于有机溶剂（如甲醇、乙醇）溶液呈紫色，浓度越高，颜色越深溶于有机溶剂（如甲醇、乙醇）、水以及水性的缓冲液溶液呈墨绿色，浓度越咼，颜色越深溶于水以及水性的缓冲液溶液呈蓝紫色，浓度越高，颜色越深CAS 号1898-66-4无18390-00-6工作液配制方法将已购的 DPPH 自由基粉末，溶解即得其工作液将已购的 ABTS 二铵盐［（NH4）2ABTS］与过二硫酸钾（K2S2O8［黑暗中反应 12 小时后，再稀将已购的 PTIO 自由基粉末，溶解即得其工作液工作液外观工作液紫外光谱与最大吸收检测波长检测原理用途紫色波长/nm(50^g/mL)519nm当 A519nm值减少，表明 DPPH・被清除。其清除机制主要是氢转移 HAT（hydrogenatomtransfer）主要用于测试一个纯的化合物或者提取物，是否具有抗氧化活性或者活性的强弱。734nm当 A734nm值减少，表明 ABTS•+被清除。其清 除 机 制 主 要 是 电 子 转 移ET（electrontransfer）主要用于测试一个纯的化合物或者提取物是否具有抗氧化活性或者活性的强弱。优势清除速度较快，约 30 分钟（室温下）。清除速度较快，约 6 分钟（室温下）。(50^g/m...