植物的组织培养在《生物技术实践》模块课程标准中,植物组织培养的具体要求是“尝试植物的组织培养”
尝试是技能性目标中的模仿水平,即学生仿照教师的示范性动作完成对实验对象的操作
植物组织培养是一项操作复杂而精细,操作难度较大的实践活动,其操作流程包括:配制母液、培养基配制与灭菌、外植体选择和消毒、接种、形成愈伤组织、诱导丛芽和生根、组培苗移栽等操作环节
从操作的持续时间看,完成前四项活动需要一天,后三项活动需要1~2 个月
为了确保在有限的时间内顺利地开展实验教学,需要确定学生动手操作的一些重要环节和步骤,并针对这些环节和步骤提前做好实验准备
1 实验室的准备工作 本实验需要作好三项实验准备:一是提前配制各种母液;二是提前准备 MS 培养基;三是选择外植体并进行预处理
1 配制母液 母液中含有大量元素、微量元素、激素(植物生物调节剂)和维生素等有机成分,母液浓度是实际溶液浓度的 5~10 倍
配制母液花费时间多,需要用到溶量瓶、移液管等精密仪器,无法由每位学生亲自操作,教师可带领部分学生在课外进行
母液的类型和配制顺序如下:配制母液的注意事项:⑴自来水或河水中含有大量的矿质元素,勿用配制母液;⑵配制大量元素和微量元素母液时,应将每种化合物单独溶解后,再一一混合,同时还应用适量的蒸馏水清洗烧杯内壁,并将清洗后的蒸馏水倒入混合溶液中,这样可以保证每种元素的浓度,混合时要按照教材附表中的顺序进行,最后加入的是氯化钙溶液,这样可以避免发生沉淀;⑶配制好的母液要先倒入 1 000 ml 烧杯中,再由烧杯转入 1 000 ml 细口瓶中,不可由容量瓶直接倒入细口瓶中;⑷注意观察母液中是否有絮状物,出现絮状物表明离子之间发生反应,需要重新配制母液;⑸植物生长调节剂难溶于水,需要碱或酸助溶,一般生长素类物质用碱(0
1 mol/LNaOH1~3 ml)或酒精(75~95%的酒精 1~3ml