TRIzol 法同时提取 RNA,DNA,蛋白质TRIzol 试剂适用于从细胞和组织中快速分离 RNA。TRIzol 试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS 法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比，最大特点是可同时分离一个样品的 RNA\DNA\蛋白质．TRIzol 使样品匀浆化，细胞裂解，溶解细胞内含物，同时因含有 RNase 抑制剂可保持 RNA 的完整性。在加入氯仿离心后，溶液分为水相和有机相，RNA 在水相中。取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA；用乙醇沉淀中间层可回收 DNA ；用异丙醇沉淀有机相可回收蛋白质。TRIzol 试剂可用于小量样品（50-100mg 组织、5×106≥细胞）也适用于大量样品（ 1g 组织、>107细胞）。对人，动物，植物组织，细菌均适用，可同时处理大量不同样品，整个提取过程在一小时内即可完成。分离的总 RNA 无蛋白质和 DNA 污染，可用于 Northern Blot，dot blot，ployA 筛选，体外翻译，RNase 保护分析和分子克隆。在用于 RT-PCR 时假如两条引物存在于一个单一外显子内，建议用无 RNase 的 DNaseⅠ 处理 RNA 样品，避开出现假阳性。共纯化的 DNA 可用作标准，比较不同样品 RNA 的得率，也可用于 PCR 和酶切。蛋白质可用于 Western Blotting 。规格：100ml 黄色透明液体储存条件：2-8℃避光保存 12 个月注意：请勿直接接触皮肤或吞咽，以免灼伤。如接触皮肤应立即用洗涤剂和大量水冲洗。忌用乙醇擦 洗，乙醇会加重灼伤程度。预防 RNase 污染注意事项：1.常常更换新手套，皮肤上常带有的细菌，霉菌可能成为 RNase 的来源。2.使用灭过菌的 RNA 专用塑料制品避开交叉污染。3.RNA 在 TRIzol 试剂中时不会被 RNase 污染，但提取后继续处理过程中应使用不含 RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在 150℃烘烤 4 小时，塑料制品可在 0.5M NaOH 中浸泡 10 分钟，然后用水彻底清洗，高压灭菌，即可去除 RNase 。4.配制溶液应使用无 RNase 的水（将水加入处理过不含 RNase 的玻璃瓶中，加入 DEPC 至终浓度0.01℅v/v,放置过夜,高压灭菌。注：DEPC 有致癌之嫌，需小心操作。）RNA 的提取准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无 RNase 的水或 0.5℅SDS(溶液均需用 DEPC 处理过的水配制) 操作步骤: 1. 匀浆处理:a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每 50-100mg 组织加入 1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过 TRIzol 体积 10℅ 。b. 单层培育细胞 直接在...
