河北省唐山市迁西县新集中学高中生物 1
2 基因工程的基本操作程序学案 新人教版选修 3一、目的基因的获取：1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的
2．获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因① 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导入受体菌的群体中 ，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库
基因组文库：含有一种生物的 基因② 种类cDNA 文库：含有一种生物的 基因③ 目的基因的获取根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物 mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因
（2）利用 PCR 技术扩增目的基因
①PCR：是一项在生物体外 特定 DNA 片段的核酸合成技术
② 条件：已知目的基因的 序列
③ 过程：目的基因 DNA 受热形成 ，与 结合，然后在 ______ 的作用下进行延伸形成 DNA
④ 方式：指数扩增=2n（n 为扩增循环的次数）（3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成
例 1、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增 DNA 片段的技术
PCR 过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板 DNA 变性、解链→55℃下复性（引物与 DNA 模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）
下列有关 PCR 过程的叙述中不正确的是A．变性过程中破坏的是 DNA 分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与 DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C．延伸过程中需要 DNA 聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D．PCR 与细胞内 DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高二、基因表达载体的构建（1）表达载体的组成：目的基因+ + +标记基因等
（2）启动子：位于基因的 ，它是 结合的部位，驱动基因转录产生 mRNA
（3）终止子：位于基因的 ，终止
