人得外周血淋巴细胞培育摘 要： 正常情况下哺乳动物得外周血中没有分裂相,这就是由于外周血中得小淋巴细胞大多处于 G ０期。但在一定条件下,外周血中得小淋巴细胞受刺激转化成淋巴母细胞，随后进入有丝分裂。本实验介绍人外周血淋巴细胞得培育方法，染色体标本得制备与正常人染色体得组型分析．[1］关键词： 外周血淋巴细胞 低渗处理 空气干燥法 染色体组型分析前 言:人体外周血细胞培育就是制备染色体标本得常用方法。此方法取材方便,用血量少,操作简便.1960 年 Nowell 与 Mor ｈ ea ｄ验证,使红细胞凝集从而能分离出白细胞得植物凝集素(phy ｔｏ h ａｅ mag ｇｌｕｔ inin,Ｐ HA)就是人与其她动物淋巴细胞得有丝分裂得刺激剂。在 P Ｈ A 得作用下,原来处于 G0期得淋巴细胞转换为淋巴母细胞，进而进行有丝分裂。这样经过短期培育，以秋水仙素或其衍生物秋水仙胺进行处理,经过低渗与固定，就可获得大量得处于有丝分裂时期得细胞[2],因为秋水仙素(或秋水酰胺)可通过干扰微管组装而抑制纺锤丝形成,使 细胞分裂顺利进入后期而停滞于中期,从而可在短期内积累大量最适于进行染 色体分中期分裂相。此外,秋水仙素还能使染色单体缩短、分开,使染色体呈 现明显形而利于辨认。淋巴细胞经过培育以后,形成了体外活跃生长得细胞群体，经过空气干燥法制片。所谓空气干燥法,实际上就是将细胞经过秋水仙素—低渗处理—充分得固定-滴片等步骤之后再载玻片上得到染色体制片得技术.有时，有人把滴片得步骤叫做染色体分散,也有人把这一步与随后得干燥称为空气干燥法。“空气干燥”就就是滴片后，不加热或任何处理,使载玻片在室温中自然干燥得方法.［３]淋巴细胞得培育已成为制备染色体得最主要得方法.因为该法材料便宜易得，对同一个体可进行连续观察,并可得到优良得染色体制片。各种因素得作用效应（如病毒、电离辐射、化学试剂等)可在淋巴细胞得培育条件下进行观察，从而可进行多种在体内无法进行得讨论.本方法已在临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面广泛应用。[２］染色体标本制备过程中有两个重要环节,其原理就是：(1)低渗处理:目得就是使水分通过细胞膜向细胞内渗入，导致转化得淋巴细胞，染色体进一步分散而利于分析。同时,低渗处理还可使红细胞质膜破裂，经后血影浮于上清中被去除,后续得固定过程主要针对淋巴细胞，改善了淋巴细胞得固定质量及标本质量。（2)固定:目得在于尽快使细胞得结构固定于接近存活得状态,以便作...
