《探究培养液中酵母菌种群数量的变化》血球计数板疑难解答血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台，中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两 半，每半边上面,刻有一个方格网，方格网上刻有 9 个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为 1mm，深度为 0.1mm，其体积为 0.1mm3。 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为 16 中格,每一中格又分为 25 小格;另一种是大方格内分为 25 中格,每一中格又分为 16 小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由 16×25 =25×16=400 个小方格组成，见图. 照片示意图盖盖玻片计数室 放大 血球计数板的使用 以计数酵母菌为例 （1）用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数. （2）样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有 4-5 个酵母细胞为宜,一般稀释 10 倍即可. （3）将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片. （4）将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸 水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. （5）计数时,如果使用 16 格×25 格规格的 计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下 4 个中格（即 100 个小格）的酵母菌数. 如果规格为 25 格×16 格的计数板,除了取其 4 个对角方位外,还需再数 中央的一个中格（即 8 0 个小方格）的酵母菌数 . （6）当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞（或只计数下方和左方线上的酵母细胞）. （7）对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每 1ml 菌液中所含的酵母菌个数. 计算公式 （1）16 格×25 格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=100 小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数 （2）25 格 x16 格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=80 小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数血球计数板的清洁 血球汁数板使用后，先浸泡一段时间，再用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用 95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。
