基因工程原理习题与答案(24 页)Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。基因工程原理习题集1、DNA 分子克隆技术：克隆，指含有单一的 DNA 重组体的无性繁殖系，或指将 DNA 重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。DNA 分子克隆技术也称基因克隆技术，是在体外将 DNA 分子片段与载体 DNA 片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程。其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成 DNA 重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。载体在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的 DNA 分子片段。主要目的是获得某一基因或 DNA 片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深化分析基因的结构与功能，随着引入的 DNA 片段不同，有两种 DNA 库，一种是基因组文库，另一种是 cDNA 库。2、分子杂交：两条不同来源的 DNA（或 RNA）链或 DNA 与 RNA 之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，这种分子称为杂交分子。形成杂交分子的过程称为分子杂交。3、限制性片段长度多态性：从不同个体制备的 DNA，使用同一种限制性内切酶酶切，切得的片段长度各不相同。酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子。通常是在酶切位点处发生突变而引发的。4、报告基因：一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应（PCR）：一种体外扩增 DNA 的方法。PCR 使用一种耐热的多聚酶，以及两个单链引物。以过高温变性将模板 DNA 分离成两条链。低温退火使得引物和一条模板单链结合，然后是中温延伸，反应液的游离核苷酸紧接着引物从 5/端到 3/端合成一条互补的新链。而新合成的 DNA 又可以继续进行上述循环，因此 DNA 的数目不断倍增。6、核酸的凝胶电泳：将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动。某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的迁移率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的摩擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。在生理条件下，核酸分子中的磷酸基团是离子化的，所以，DNA 和 RNA 实际上呈多聚阴离子状态。将 DNA、RNA 放到电场中，它就会由负极向正极移动。在凝胶电泳中，一般加入溴化乙锭进行染色，此时，核酸分子在紫外光下发出荧光，肉眼...
