1.基因工程（DNA 重组技术/基因拼接技术）基因工程是指根据人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，给予生物以新的遗传特性，从而制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做 DNA 重组技术或基因拼接技术。2.DNA 重组技术的基本工具①、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶（限制酶）A、作用——限制性核酸内切酶能识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并在使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开B、限制性内切酶的切割方式：①在中心轴线两侧将 DNA 切开，切口是黏性末端。 ② 沿着中心轴线切开 DNA，切口是平末端。大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别 GAATTC 序列，SmaI 识别CCCGGG 序列:G A A T T C C T T A A G 中轴线C T T A A G A A T T C G C C C G G G G G G C C C C C C G G G G G G C C C 黏性末端平末端他们识别的核苷酸序列不同,但是切点都是在 G↓C 之间。C、比较有关的 DNA 酶（1）DNA 水解酶：能够将 DNA 水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基 （2）DNA 解旋酶：能够将 DNA 或 DNA 的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使 DNA 解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温（如 94℃）、重金属盐的作用下，也可使 DNA 解旋。 （3）DNA 聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成 DNA 长链。 （4）DNA 连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链 DNA 的缺口。注意比较 DNA 聚合酶和 DNA 连接酶的异同点。②.DNA 连接酶——“分子缝合针”（ 1 ） DNA 连 接 酶 的 分 类 ： E.coliDNA （ 大 肠 杆 菌 ） 连 接 酶 和T4DNA（T4 噬菌体）连接酶。（2）作用及作用部位：E.coliDNA 连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA 连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键（平末端较弱）。③.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”（1）分子运载车的分类：①质粒：常存在于原核细胞和酵母菌中，是一种分子质量较小的环状的裸露的 DNA 分子，独立于拟核之外。②病毒：常用的病毒有噬菌体、动植物病毒等。（2）运载体使用的目的：①是用它做运载工具，将目的基因转运到宿主细胞中去。②是利用它在受体细胞内对目的基因...
