人体 X 染色质观察 生 76 刘森 2025030073 同组人：李逸群 周斐 廖若西 袁堂谧 蒋超 刘铁军一、实验目的1．通过实验掌握鉴定人类 X 染色质的方法，在显微镜下正确识别 Barr 小体的特征及其所在位置。了解 X 染色体失活的有关理论假说以及失活染色体尚的基因所控制的遗传形状的特点。二、实验原理雌性个体细胞的 2 条 X 染色体中，有一条在间期是处在不活动的异固缩状态，从而形成了 X 染色质又称 Barr 小体。后来人们知道这和情况在哺乳类动物的雌性个体都存在，即雌性哺乳类动物细胞内的 X 染色体在间期内仅有一条呈松散状态，参加细胞生理活动，另一条则保持固缩状态。Barr 小体出现在哺乳动物雌性个体细胞的细胞核边缘，这主要是因为这条染色体处在失活状态，在 DNA 复制时总是落后于其他染色质所致。剂量补偿效应是指 XY 型性别决定的生物，由 X 性染色体上的基因决定的性状在两性的表现几乎相同。也就是说 X 染色体上的基因的表达产物在雌雄动物的细胞中是等量的。这种剂量补偿效应可以通过两种途径实现：一是 X 染色体的转录速率的差异，即雌性动物细胞中的两条 X 染色体的转录速率低于雄性细胞中单条 X 染色体的转录速率，因而造成雌性和雄性细胞的总体表达水平接近；二是雌性细胞中有一条 X 染色体在功能上是失活的。1966 年，M.F.Lyon 根据许多讨论结果提出了 X 染色体失活的假说，主要内容为：在正常的雌性哺乳动物的体细胞中，一条 X 染色体在遗传上有活性，而另一条处于失活状态。这种失活发生在胚胎发育的早期，失活是随机的。但是一旦发生了失活，这个细胞的后代将处于失活状态。X 染色体上的杂合基因将出现嵌合现象。Lyon 假说虽然可以解释一些问题但不是全部，三、实验器材 光学显微镜，载玻片，盖玻片，牙签，吸水纸，离心机，吸管，固定液，2.0g/L 甲苯铵蓝染色液，生理盐水。四、实验步骤1．取材：先漱口三次，将口腔内杂物漱出。然后用牙签的钝面刮取口腔颊部粘膜细胞，将其放人盛有 3ml 生理盐水的离心管中，轻轻摇动使细胞分散于生理盐水中。2．离心收集细胞：以 1600 r/min 离心 1Omin。3．固定：离心结束后，轻轻将上清液除去。留下的沉淀物用固定液固定 10min。4．离心：1200 r/min 离心 1Omin。5．制备细胞悬液：去掉上清液，根据细胞沉淀量加入 1ml 新配制的固定液，用吸管吹打成细胞悬液。6．滴片：用吸管将细胞悬液滴在载玻片上，在空气中干燥。...
