大肠杆菌非中断杂交实验预先准备材料：枪头(0.2，1 和 5mL )，Appendorf 管，生理盐水灭菌并分装，涂布棒，酒精灯，40 个 500mL 三角瓶，牙签，圆格纸，10mL 的试管，15mL 离心管，一次性滤膜。橡皮筋。 平板和培育基量计算：4 个人为一组，周二班有 15 组，周四班有 15 组：A 板： 5 个/组 × 30 组 = 150 个； 25mL/板 × 150=3750mL B~G 板：各需 2 个/组 ×30 组 = 60 个；共需平板：60× 6 =360 个； 25mL/板 × 60= 1500mLNotes：A 板要做预实验，并且要多为学生准备出一些。B~G 板要略微多算出些。综上：培育基：A 培育基共配置 4800mL；B~G 培育基各 2100mL。 平板个数：192(A) + 84 × 6 =796 个； 可以考虑准备 900 个。 三角瓶个数：16+7× 6 = 58；每个三角瓶装 300mL 培育基。第一周 周四班: 1. 配制基础培育基各种成分的母液任务分配如下(每两名同学合作配一种溶液)：Group No.试剂名称试剂浓度试剂称重定容体积备注3-110×A 磷 酸 缓 冲液（ 专 门 用 一台天平）2L, 调pH=7.0K2HPO4·3H2O275.1gKH2PO490g(NH4)2SO420g二水合柠檬酸钠22.78g3-2MgSO4·7H2O0.25 M6.12g100mLIle10 mg/mL1g100mL3-3硫氨素1 mg/mL100mg100mLVal10 mg/mL1g100mL4-1葡萄糖200.0 g/L100g500mLArg10 mg/mL1g100mL4-2Ade10 mg/mL1g100mL先 用 1N盐酸溶解 ， 再 加水5M 盐酸200mL确 认 ，不 够 则 稀释 20M 盐酸4-3半乳糖200.0 g/L20g100mL乳糖200.0 g/L20g100mL5-1Trp10 mg/mL1g100mL50~60℃溶解5MNaOH5mol/L40g200mL5-2His10 mg/mL1g100mL链霉素50 mg/mL5g100mL2.溶液分装（分工好避开加重）：Group No.试剂名称三角瓶字母编号(瓶子个数)瓶子总数A(16)B(7)C(7)D(7)E(7)F(7)G(7)5-3,6-110×A 磷酸缓冲液(mL)30303030303030586-2MgSO4 (mL)1.21.21.21.21.21.21.2586-3,7-1琼脂粉(g)6666666587-2,7-3水(mL)260260260260260260260588-1,8-2调 pH 至 7.0~7.2---------------------583. 包平板等Group No.内容8-3包 50 个平板9-1包 50 个平板9-2包 50 个平板9-3包 50 个平板10-1包 50 个平板10-2包 50 个平板10-3包 50 个平板11-1包 50 个平板11-210mL 的试管 50 个11-310mL 的试管 50 个12-1包涂布棒 60 个12-2包 12 盒 1mL 枪头（蓝枪头）；包 6 盒 200uL 枪头（黄枪头）4．灭菌。平板、培育基和枪头灭菌工作...
