§菌种管由传统的玻璃菌种管改为 0.5ml 带盖塑料离心管。方法：① 将塑料离心管置耐高压塑料离心管盒内并用双层报纸包好，高压蒸汽 15 磅15min 消毒，放烤箱 80℃烤干。② 在净化工作台内将脱脂牛奶洗下的浓厚菌悬液用长毛细玻璃滴管加到塑料离心管的底部，每只 0.2ml 左右，切记不要将牛奶污染离心管口。③ 将加好菌液的离心管盒置-20℃冰箱预冻，预冻好后把离心管盒放置到冷冻干燥机干燥箱内冻干。④ 冻干后在净化工作台内压好离心管盖，不抽真空。贴标签，用封口膜封离心管口。放-20℃冰箱保存。 §该改良法优点有：⑴ 操作过程大大简化，菌种管口不需溶封，不抽真空。⑵ 菌种管抗破损性极佳；⑶ 菌种管体积超小。⑷成本低廉，易于商品化生产、推广。笔者使用该改良法近七年，本省发放菌种上万只没有破损情况出现；数次发放嗜血杆菌、链球菌、奈瑟氏菌等苛养菌，生长情况良好。近几年我们还向华东地区部分兄弟省分提供了室间质评菌种四万余只，效果满意。实验——微生物菌种常规保藏方法 录入时间:2025-4-13 9:30:37 来源：天津农学院精品课程菌种是一种重要的生物资源，菌种保藏是重要的微生物基础工作。菌种保藏就是利用一切条件使菌种不死、不衰、不变，以便于讨论与应用。 1 目的 1.1 了解菌种保藏的基本原理 1.2 掌握几种常用的菌种保藏方法。 2 原理 菌种保藏的方法很多。其原理却大同小异，不外乎为优良菌株制造一个适合长期休眠的环境,即干燥、低温、缺乏氧气和养料等。使微生物的代谢活动处于最低的状态，但又不至于死亡，从而达到保藏的目的。依据不同的菌种或不同的需求，应该选用不同的保藏方法。一般情况下，斜面保藏、半固体穿刺,石蜡油封存和砂土管保藏法较为常用，也比较容易制作。 3 材料 3.1 菌株 待保藏的适龄菌株斜面 3.2 培育基 肉汤蛋白胨斜面，半固体及液体培育基。 3.3 试剂 10%HCl 无水氯化钙、石蜡油、五氧化二磷。 3.4 器具 用于菌种保藏的小试管(10*100 毫米)数支、5 毫升无菌吸管、l 毫升无菌吸管等、灭菌锅、真空泵、干燥器、冰箱无菌水、筛子(40 目、120 目)、标签、接种针、接种环、棉花、牛角匙等等。 4 流程 斜面保藏→半固体穿刺保藏→石蜡油封存→砂土管保藏 5 步骤 5.1 斜面保藏 5.1.1 流程 标记试管→接种→培育→保藏 5.1.2 步骤 5.1.2.1 贴标签 取无菌的肉汤蛋白胨斜面数支。在斜面的正上方距离试管口 2-3 厘米处贴上标签。在标签纸...
