附件畜肉中卡拉胶的测定（BJS202504）1 范围本方法规定了生、鲜肉中卡拉胶的液相色谱-串联质谱测定方法。本方法适用于生鲜肉、冷却肉、冻肉中卡拉胶的定量测定。2 原理样品经匀浆后，用盐酸溶液处理，其中的卡拉胶降解生成特征性寡糖，用液相色谱-串联三重四极杆质谱检测寡糖含量，外标法定量。3 试剂和材料本方法所用水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。3.1 试剂3.1.1 乙腈（CH3CN）：色谱纯。3.1.2 甲酸铵（HCOONH4）：色谱纯。3.1.3 盐酸（HCl）：优级纯。3.2 试剂配制10 mM 甲酸铵水溶液：称取甲酸铵（3.1.2）0.63 g，用水溶解并定容至 1000 mL。3.3 标准品卡拉胶：食品添加剂级。3.4 标准储备液的配制称取卡拉胶 0.1 g（精确至 0.1 mg），用 60℃温水溶解，转移至 10 mL 容量瓶中，冷却至室温后，用水定容至刻度。此溶液浓度为 10 mg/mL，现用现配。4 仪器和设备4.1 高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI 源）。4.2 分析天平：感量为 0.0001 g。4.3 分析天平：感量为 0.01 g。4.4 离心机：转速≥4 000 r/min。4.5 涡旋混合器。4.6 食品粉碎机。4.7 匀浆机。4.8 恒温水浴。5 试样制备和保存依据 GB/T 9695.19-2025 规定的方法取样。样品剔除脂肪组织，瘦肉部分（＞100 g）用食品粉碎机（4.6）粉碎混匀。混匀好的样品分成两份，分别作为试样（＞50 g）和留样（＞50 g），装入干净容器中，密封并标记，于 -18 ℃保存。6 试样处理6.1 基质加标工作液称取 4 份打碎混匀的空白基质（确定不含卡拉胶的畜肉）各 10 g（精确至 0.01 g）于 50 mL离心管中，分别加入标准储备液（3.4）0.1 mL，0.2 mL，0.3 mL，0.4 mL，加入水使液体的总体积为 23 mL，10000 rpm 匀浆 1 min，加入 2 mL 盐酸（3.1.3），加盖后涡旋 30 s，置于 80℃水浴中 20 min，每 10 min 取出振摇一次。取出冷却后，4000 rpm 离心 5 min，取上清液 1 mL，用乙腈1:1 稀释后，过滤膜（0.22 m,有机相），待测。6.2 样品待测液称取 10 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 离心管中，加入 23 mL 水，10000 rpm 匀浆 1 min，加入 2 mL 盐酸（3.1.3），加盖后涡旋 30 s，置于 80℃水浴中 20 min，每 10 min 取出振摇一次。取出冷却后，4000 rpm 离心 5 min，取上清液 1 mL，用乙腈 1:1 稀释后，过滤膜（0.22 m,有机相），待测。7 测定7.1 参...
