CFX-荧光定量PCR仪操作指南

CFX96 实时荧光定量 PCR 仪操作流程及注意事项开始运行仪器打开电脑打开定量 PCR 仪底座开关启动 CFX Manager 软件 放置样品将 PCR 反应体系加入到 0。2ml 低缘八联管，盖上管盖；或加入低缘 96 孔板，用光学级封膜封好。注意,必须带一次性塑料手套,不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中. 设置程序，运行实验定量 PCR 软件操作基本步骤为：a. 设置热循环程序文件（Protocol Tab） b。设置反应板文件（Plate Tab）。 C。点击“Start Run”键，运行程序热循环程序文件（Protocol Tab）设置指南：点击Edit（编辑）或 Create New(创建新程序）。反应板设置文件（Plate Tab）设置指南：选择本次实验所要使用的荧光染料种类；单击样品类型；如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品（Standard），点击“Dilution Series”键可设置其标准品浓度及稀释倍数。点击“Start Run”键.单击 open lid（打开热盖)或 Close lid（关闭热盖）放置样品；单击 Start Run，保存文件，开始运行程序. 结果分析PCR 反应结束后，软件会自动计算标准曲线和 Ct 值等.如需进行表达量分析、等位基因分析等， 在软件窗口选择相应分析功能。点击右上方的“Report”键，还可输出结果报告单 关闭运行仪器实验结束后取出反应管，顺序关闭 CFX Manager 软件、定量 PCR 仪电源，关闭电脑。注意！CFX 仪器上盖部分为全自动控制,在通电状态，严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为,此类行为会导致上盖故障，危及仪器使用。CFX Manager 软件操作快速指南实验操作程序设置图 1 显示实验设置窗口中一个预览的程序。点击 Create New，打开程序编辑器创建一个新的程序。点击 Select Existing,通过浏览器加载一个程序或对其进行编辑。使用 Express Load 下拉菜单直接加载一个程序或对其进行编辑。点击 Edit Selected，打开程序编辑器编辑所选程序的各个步骤。点击 Start Run 开始运行当前加载的程序。程序编辑器程序编辑器可用来创建一个新程序或编辑一个已存在的程序，图 2。 1．在图形或文本模式下选择任何需要编辑的一步(该步骤会用蓝色高亮显示），点击温度或保持时间进行直接编辑.2．点击 Insert Step 在程序中增加一个温度步骤.点击 Delete Step 在程序中删除选中的步骤。3．点击 Add Plate Read to Step,在程序中指定猎取荧光数据的时间.假如当前的高亮显示步骤已经进...