农杆菌转化法原理： 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位（受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞),并诱导产生冠瘿瘤或发状根。 根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有 Ti 质粒和 Ri 质粒，其上有一段 T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将 T—DNA 插入到植物基因组中，并且可以通过减速分裂稳定的遗传给后代，这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。 人们将目的基因插入到经过改造的 T-DNA 区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培育技术，再生出转基因植株.农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。 农杆菌转化植物细胞涉及一系列复杂的反应，主要包括：①受伤的植物细胞为修复创伤部位，释放一些糖类、酚类等信号分子。②在信号分子的诱导下，农杆菌向受伤组织集中,并吸附在细胞表面。③转移 DNA 上的毒粒基因被激活并表达，同时形成转移 DNA 的中间体。④转移 DNA 进入植物细胞，并整合到植物细胞基因组中。 方法：（根据不同受体环境基因要求而不同） 1． 农杆菌准备 2． 外植体的准备（愈伤组织、悬浮细胞系、幼嫩茎段或叶片); 3． 用 MS-AS 液体培育基稀释原菌液 15 倍（1.5ml / 20ml）或离心后稀释 3 倍; 4． 外植体与菌液共培育 20 分钟; 5． 放置在带滤纸的培育皿上(注意充分吸干多余的菌液)； 6． 将外植体接种到 MS—AS 固体诱导培育基，培育 2－3 天 ; 7． 移至含卡那霉素(Kan）300mg/L 和羧苄青霉素(Cb 300mg/L）的固体筛选培育基上进行 Kan 抗性愈伤组织的筛选; 8． 隔 20 天，进行第二次筛选； 9． 抗性愈伤组织在固体筛选培育基上分化成苗； 10 在生根培育基上生根，获得完整的再分化植株。
