农药残毒快速检测

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测酶抑制率法（分光光度法）专用试剂使用说明本试剂为国家标准快速检验方法 GB/T5009.199—2025 的专用配套试剂.酶活性和对农药的灵敏度指标均达到或超过了国家标准要求，可以在各种型号的农药残毒检测仪（分光光度法）上使用，具有稳定性好、灵敏度高和使用方便等特点。一、试剂配制1.缓冲液试剂：整包倒入大烧杯中，加 1000mL 纯净水溶解,酸碱度为 pH8。0，常温保存；2。乙酰胆碱酯酶:取一支酶粉加 20mL 缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保存，一周内用完。也可将溶解后的酶液分成几个小瓶，将其冷冻，用时融化，但不能重复多次冷冻、化解。3。显色剂：取一支显色剂加入 20mL 缓冲溶液，避光保存；4.底物：取一支底物加 20mL 缓冲溶液,摇匀后置 4℃冰箱中保存；二、分析步骤1。样品处理:选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成 1cm 左右见方碎片，取样品 1g,（非叶菜类取 2g)放入烧杯或提取瓶中,加入 5mL 缓冲溶液,手摇振荡 1~2 分钟,或超声波振荡 30 秒钟，倒出提取液，静置 3～5min，待用。2.对比溶液测试: 先于试管中加入 100 微升酶液和 100 微升显色剂,再加入 2.5mL 缓冲溶液，摇匀后于37°C 放置 15min，加入 100 微升底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录初始吸光度 A1和反应 3 min 时的吸光度 A2,A2—A1=DA0.3。样品溶液测试：先于试管中加入 100 微升酶液和 100 微升显色剂,再加入 2。5mL 样品提取液，其它操作与对比溶液测试相同,记录初始吸光度 A1和反应 3 min 时的吸光度 A2，A2—A1=DAt.三、结果计算结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示.抑制率（％)=[ (DA0-DAt)/DA0］×100 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验 2 次以上.对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。四、注意1.每批样品的控制时间、温度条件必须与对比溶液的条件完全一致。2。葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时,不要剪的太碎。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也不要剪的太碎。3。当温度条件低于 37°C,酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶对比溶液测试得到的吸光度 A...