DNA 重组技术的基本工具一、基因工程的概念及其诞生与发展1.基因工程的概念[填表]别名DNA 重组 技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA 分子 水平结果创造出人类需要的新的生物类型和生物产品2.基因工程的诞生和发展(1)基础理论的突破:DNA 是遗传物质的证明;DNA 双螺旋结构和中心法则的确立;遗传密码的破译
(2)技术的发明:基因转移载体和工具酶的相继发现;DNA 合成和测序 技术的发明;DNA体外重组的实现及重组 DNA 表达 实验的成功;第一例转基因动物的问世及 PCR 技术的发明
二、DNA 重组技术的基本工具1.限制性核酸内切酶(又称限制酶)(1)来源:主要来自原核生物
(2)功能:能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
(3)结果:产生黏性末端或平末端
(4)应用:已知限制酶 EcoRⅠ 和 SmaⅠ 识别的碱基序列和酶切位点分别为 G↓AATTC 和CCC↓GGG,在图中写出两种限制酶切割 DNA 后产生的末端并写出末端的种类
基因工程的基本原理是基因重组,外源 DNA 能在受体细胞表达的理论基础是密码子的通用性
2.DNA 重组技术的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA 连接酶和使目的基因进入受体细胞的载体
3.限制性核酸内切酶可识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列,并在特定位点上切割
4.E·coli DNA 连接酶只能连接黏性末端,而 T4DNA 连接酶既能连接黏性末端也能连接平末端
5.质粒作为基因工程的载体需具备的条件有:能在宿主细胞内稳定保存并自我复制;具有一个或多个限制酶切割位点;具有标记基因
6.在基因工程中使用的载体除质粒外,还有 λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等
EcoRⅠ 限制酶和 SmaⅠ 限制酶识别的碱基序列不同,切割位点不同(填“相同”或“不同”)