1．2.1 目的基因的获取和基因表达载体的构建[学习目标] 1.说出基因工程的基本操作程序。 2.理解获取目的基因的途径。3.说出基因表达载体的构建的目的与组成。方式一 抑制疾病传播的转基因蚊子巴西等拉美国家深受致倦库蚊的危害。致倦库蚊可携带多种病毒和寄生虫，能够传播脑炎、丝虫等传染病，而这些传染病常年在拉美国家肆虐。为了抑制疾病的传播，巴西科学家培育出了一种转基因雄性致倦库蚊。科学家在雄性致倦库蚊体内植入一种特殊基因，当具该基因的转基因雄蚊与野生雌蚊交配时，这种基因可以进入雌蚊的基因组，并使雌蚊死亡，从而减少了该种蚊子的数量，达到抑制疾病传播的目的。怎样才能最终得到转基因雄蚊呢？让我们一起来学习基因工程的基本操作程序吧！方式二 师：出示我国有知识产权的转基因抗虫棉的培育图解：问：转基因抗虫棉的培育需要哪些步骤？学生看图并回答：首先要获得目的基因，其次将目的基因连接到 Ti 质粒上，然后将重组的 Ti质粒导入受体细胞，最后要重建转基因植物。根据学生回答补充：还需检测抗虫基因是否已经进入棉花植株，并由此引出基因工程的四部曲。一、目的基因的获取1．基因工程的基本操作程序(1)目的基因的获取。(2)基因表达载体的构建。(3)将目的基因导入受体细胞。(4)目的基因的检测与鉴定。2．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。(2)常见方法① 从基因文库中获取a．基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。b．种类c．提取依据：基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性。1② 利用 PCR 技术扩增目的基因a．PCR 的含义：是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。b．目的：短时间内大量扩增目的基因。c．原理：DNA 双链复制 。d．前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列。e．过程第一步：加热至 90～95 ℃，DNA 解链为单链 ；第二步：冷却至 55 ～ 60 ℃，引物结合到互补 DNA 链；第三步：加热至 70～75 ℃，热稳定 DNA 聚合酶 (Taq 酶)从引物起始进行互补链的合成。如此重复循环多次。f．结果：每一次循环后，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为 2n，n 为扩增循环的次数)。③ 化学方法直接人工合成a．条件：基因比较小，核苷酸...
