微生物的实验室培养一、培养基1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。2．种类：(按物理性质分)3．营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对 pH、特殊营养物质以及氧气的要求。二、无菌技术1．获取纯净培养物的方法获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，具体操作如下：(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2．消毒和灭菌(1)概念：[填表]比较项目理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和物体表面或内部的部分微生物不能灭菌强烈物体内外所有的微生物能(2)常用方法：[连线]1.培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。4．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)操作步骤：→→→→(2)倒平板的方法及注意事项：① 请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。② 甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。③ 丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。2．纯化大肠杆菌(1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)接种方法：① 平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。② 稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。(3)培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入 37_℃恒温箱中，培养 12 h和 24 h 后，分别观察、记录。四、菌种的保存[连线]1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含( )A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、...
