土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。2．统计菌落数目(1)活菌计数法：常用稀释涂布平板法。① 原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。② 计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M。C：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。M：代表稀释倍数。③ 统计方法：为了保证结果准确，一般设置 3～5 个平板，选择菌落数在 30 ～ 300 的平板进行计数，并取其平均值。(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。3．设置对照(1)对照实验：指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。二、实验设计1．土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。先铲去表层土，在距地表约 3 ～ 8 1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件 (包括营养、温度、pH 等)同时抑制或阻止其他微生物的生长。2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。3．测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌的实际数目低。4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。5．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，依据是否变红进行判断。cm 的土壤层取样。2．样品的稀释(1)稀释原因：样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。(2)稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在 30 ～ 300 之间，便于计数。3．微生物的培养与观察(1)培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。(2)观察：每隔 24_h 统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。三、操作提示1．无菌操作(1)取土样的用具在使用前都需要灭菌。(2)应在...
