第 6 课时 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[学习导航] 1.通过分析具体培养基的配方,归纳选择培养基的选择作用,理解筛选微生物的原理。2.结合实验设计,分析微生物数量测定实验中产生偏差的原因及解决措施,学会微生物的计数方法,并对培养结果进行分析和评价。[重难点击] 1.研究培养基对微生物的选择作用,进行微生物数量的测定。2.能利用选择培养基分离细菌,运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数问题。一、研究培养基对微生物的选择作用1.筛选菌株(1)自然界中目的菌株的筛选① 原理:根据目的菌株对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。② 实例:能产生耐高温的 Taq DNA 聚合酶的 Taq 细菌 就是从热泉中筛选出来的。(2)实验室中目的菌株的筛选① 原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等),同时抑制或阻止其他微生物生长。② 实例:从土壤中筛选能分解尿素的细菌。③ 方法:利用选择培养基进行微生物的筛选。2.选择培养基(1)概念:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。(2)举例:筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源,按物理性质归类为固体培养基。1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基下面是本课题使用的培养基的配方,请分析:KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO4·7H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g琼脂15.0 g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到 1 000 mL(1)在培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质?答案 碳源是葡萄糖,氮源是尿素。(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的?答案 该选择培养基的配方中,尿素是培养基中的唯一氮源,因此,只有能够利用尿素的微生物才能够生长。(3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长?答案 分解尿素的微生物能合成脲酶,而脲酶可将尿素分解成氨,从而为微生物提供氮源。2.设计对照实验(1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌?答案 增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作,如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数,则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。(2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染?答案 设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。归纳总结 选择培养基的分类1利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养:通过控...