动物细胞培养和核移植技术1．阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。(重、难点) 2.阐明细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎继而发育成动物个体的过程。 3.举例说出生殖性克隆人面临的伦理问题。 4.分析说明我国为什么不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。知识点一 动物细胞培养1．概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2．原理：细胞增殖。3．过程动物组织块：取动物胚胎或幼龄动物的器官或组织剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 单细胞细胞悬液原代培养：动物组织消化后的初次培养贴附性细胞用胰蛋白酶处理，分瓶，传代培养10 代细胞传代培养50 代左右细胞4．条件(1)无菌、无毒的环境① 培养液和所有培养用具应进行无菌处理。② 通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防污染。③ 定期更换培养液，防止细胞代谢产物的危害。(2)营养① 合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。② 合成培养基特点：加入血清、血浆等天然成分。(3)温度和 pH：温度为 36.5±0.5 ℃；pH 为 7.2 ～ 7.4 。(4)气体环境：95%空气＋5%CO2的混合气体。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的 pH。.应用(1)生产生物制品：如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(2)应用于基因工程：动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞，离不开动物细胞培养。(3)检测有毒物质，判断某种物质的毒性。(4)用于生理、病理、药理等方面的研究，如筛选抗癌药物等。1．动物细胞培养过程解读(1)细胞贴壁和接触抑制① 细胞贴壁用培养液将分散的动物细胞稀释制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜的环境中培养，悬液中分散的细胞很快会贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。② 接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。打破接触抑制现象的方法是将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。(2)原代培养和传代培养原代培养和传代培养一般均需对细胞用胰蛋白酶进行分散处理，区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。① 第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，分散后培养，即为原代培...
