月季花的花药培养 一、被子植物的花粉发育1.花粉:是由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞
2.花粉的发育过程二、产生花粉植株的两种途径两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比
三、影响花药培养的因素1.主要因素:材料的选择与培养基的组成
(1)花药方面,应选择初花期的花药
(2)花粉方面,应选择单核期的花粉
(3)花蕾方面,应选择完全未开放的花蕾
2.其他因素:亲本植株的生长条件、材料的低温预处理及接种密度等
四、花药培养的实验操作―→―→―→―→1.材料的选取1
被子植物花粉发育的基本过程:小孢子母细胞→小孢子四分体时期→单核期→双核期
2.花药培养产生花粉植株有两条途径:一是胚状体途径,二是愈伤组织途径,这两种途径主要取决于激素的种类及其浓度配比
3.影响花药培养的主要因素是材料的选择与培养基的组成
选择单核靠边期的花药培养成功率最高
4.确定花粉发育时期的方法有醋酸洋红法 (最常用)和焙花青一铬矾法(花粉细胞核不易着色时)
5.在花药培养中,常常会出现染色体倍性的变化
(1)花粉的鉴定:一般通过镜检来确定花药中的花粉是否处于适宜的发育期
(2)镜检方法:最常用的方法是醋酸洋红法
但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青—铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色
2.材料的消毒(1)将花蕾放入体积分数为 70%的酒精中浸泡约 30 s,立即取出,在无菌水中冲洗,后用无菌吸水纸吸干
(2)放入质量分数为 0
1%的氯化汞溶液中 2~4 min,再用无菌水冲洗 3~5 次
3.接种(1)剥离花药时,尽量不损伤花药,彻底去除花丝
(2)每瓶接种花药 7 ~ 10 个
4.培养(1)温度:25_℃左右
(2)光照:开始不需要光照,幼小植株形成后才需要光照
(3)转移:将愈伤组织及时转移到分化培养基上;如果释放出胚状体,尽快将幼小植