酵母细胞的固定化【教学目标】1、说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理
2、尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵
【知识梳理】 一、 基础知识(一)课题背景:1、问题:酶对环境条件敏感,易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本;反应后的酶会混合在产物中,如不除去,会影响产品质量
2、固定化酶技术:将酶固定在不溶于水的载体上
优点:使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以反复利用
缺点:一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都是通过一 系列的酶促反应才能得到的
3、固定化细胞技术:将合成酶的细胞直接固定
优点:成本更低,操作更容易
(二)、固定化酶的应用实例1、反应原理:葡萄糖被葡萄糖异构酶分解成果糖
2、固定化酶技术: 使用固定化酶技术,将这种酶(葡萄糖异构酶)固定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的筛板
酶颗粒无法通过筛板上的小孔,而反应溶液却可以自由出入
生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出
反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量
(三)、固定化细胞技术1、(1)固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法法
(2)一般来说,酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定,而细胞多采用包埋法固定化
这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出
2、使用包埋法固定细胞即将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载聚丙烯酰胺等
二、设计实验(一)制备固定化酵母细胞1、酵母细胞的活化:由休眠状态重新恢复为正常的生活状态
2、配制物质的量