血红蛋白的提取和分离 一、蛋白质分离的原理和方法1．分离原理依据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等。2．凝胶色谱法(1)概念：也称为分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。(2)凝胶：微小的多孔球体，大多数由多糖类化合物构成，内部有许多贯穿的通道。(3)原理：[填表]蛋白质类型能否进入凝胶内部移动路程移动速度相对分子质量较小能较长较慢相对分子质量较大不能较短较快3．缓冲溶液(1)作用：在一定范围内，抑制外界的酸和碱对溶液 pH 的影响，维持 pH 基本不变。(2)配制：由 1～2 种缓冲剂溶解于水中配制而成，通过调节缓冲剂的使用比例就可以得到不同 pH 范围内使用的缓冲液。4．电泳(1)概念：指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。(2)原理：① 许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的 pH 下，这些基团会带上正电或负电。② 在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。③ 电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。1.凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法，相对分子质量大的先洗脱出来，相对分子质量小的后洗脱出来。2．在电泳中，待分离样品中分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状都会影响分子的迁移速度。3．SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移率完全取决于分子的大小。4．蛋白质提取和分离的一般步骤是：样品处理及粗分离、纯化和纯度鉴定。5．透析法可除去相对分子质量较小的杂质。6．在对蛋白质进行纯度鉴定时，使用最多的方法是 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。④ 方法：常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。二、血红蛋白提取和分离的实验操作[填图]1．凝胶色谱法中移动速度快的是( )A．相对分子质量大的 B．相对分子质量小的C．溶解度高的 D．溶解度低的解析：选 A 凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。当不同蛋白质通过凝胶时，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。2．下列各项中，不是电泳使样品中各种分子分离的原因的是( )A．带电性质差异 B．分子的大小C．...
